詳細(xì)介紹
兔前列腺成纖維原代細(xì)胞
兔前列腺成纖維細(xì)胞分離自前列腺組織,;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官,;前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子,,底朝上,與膀胱相貼,,尖朝下,,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,,后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò),扼守著尿道上口,,所以,,前列腺有問(wèn)題時(shí),排尿首先受影響,。前列腺是機(jī)體非常少有的,,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺,,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分,;作為內(nèi)分泌腺,,前列腺分泌的激素稱(chēng)為“前列腺素"。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的前列腺成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長(zhǎng),,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
英文名稱(chēng) | Rabbit Prostate Fibroblast Cells | 組織來(lái)源 | 前列腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7996 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng):兔前列腺成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源:前列腺
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右,;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔前列腺成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔前列腺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔前列腺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
SF17細(xì)胞,,人腦瘤細(xì)胞 洋蔥假單胞菌 人角膜細(xì)胞總RNAHK NA | 酸化細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體 |
酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 | 轉(zhuǎn)酮醇酶(轉(zhuǎn)羥乙醛酶)抗體(C端) |
腫瘤抑制基因抗體(野生型P53) | 酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 |
轉(zhuǎn)化突起蛋白抗體 | 酸化細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體 |
酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 | 轉(zhuǎn)酮醇酶(轉(zhuǎn)羥乙醛酶)抗體(C端) |
RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 大鼠肝細(xì)胞;IAR20 |
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2 小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 Mouse |
CM-H046人肝星形細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] |
SH-SY5Y人母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SH-SY5Y human neuroblastoma cells MEM/F-12(1:1)+10%FBS | 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物HASMCL |
HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞 單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞,RAW264.7細(xì)胞 Hep G2(人肝癌細(xì)胞) | 兔前列腺成纖維原代細(xì)胞酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 |
人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63 | 人癌細(xì)胞;MDA-MB-453 人角膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
CCL1 Others Mouse 小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CM-H133人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
細(xì)胞名稱(chēng) 種屬 | 酸化周期蛋白依賴(lài)激酶抑制因子1C抗體 |
轉(zhuǎn)化突起蛋白抗體 | SK-OV-3 人卵巢腺癌細(xì)胞 |
酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 | 腫瘤抑制基因抗體(野生型P53) |
酸化周期蛋白依賴(lài)激酶抑制因子1C抗體 | RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |