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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔脾淋巴采用機械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×106cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔脾淋巴經(jīng)過檢測,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔脾淋巴原代細胞 | 組織來源 | 脾臟 |
英文名稱 | Rabbit Spleen Lymphocyte Cells | 貨號 | YS-01X7818 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔脾淋巴細胞分離自脾臟組織；脾臟是機體大的免疫器官,，占全身淋巴組織總量的25%,，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，是機體細胞免疫和體液免疫的中心,。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,，與9－11肋相對，長軸與第10肋一致,。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,，前方有胃，后方與左腎,、左腎上腺毗鄰,，下端與結(jié)腸脾溝相鄰，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞器官,。淋巴細胞（lymphocyte）白細胞的一種,，由淋巴器官產(chǎn)生，機體免疫應(yīng)答功能的重要細胞成分,。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異,，可分為中樞淋巴器官（又名初級淋巴器官）和周圍淋巴器官（又名次級淋巴器官）兩類。前者包括胸腺,、腔上囊或其相當器官（有人認為在哺乳動物是骨髓）,。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細胞，成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官,。后者包括脾,、淋巴結(jié)等。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖,，繼而發(fā)揮其免疫功能,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔脾淋巴細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
A498-EGFP-puro人腎癌細胞 Human renal cell carcinoma A498-EGFP-puro cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin | 酸化細胞分裂周期蛋白25B抗體 |
酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 | 轉(zhuǎn)醛醇酶抗體 |
腫瘤抑制基因P53蛋白抗體（野生型P53） | 酸化葡萄糖合成酶1抗體 |
主導控制樣蛋白1抗體 | 酸化細胞分裂周期蛋白25B抗體 |
酸化葡萄糖合成酶1抗體 | 轉(zhuǎn)醛醇酶抗體 |
GDF15 Protein Human 重組人 GDF-15 蛋白 (Fc 標簽) | 中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I |
SMC-1細胞,，胸膜細胞瘤 早幼粒急性白血病細胞系,HL-60細胞 小鼠子細胞;U14 | 小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP |
人子宮內(nèi)膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | CXCL9 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 |
Caco-2 人結(jié)直腸腺癌細胞 | 人肝臟細胞裂解物HHL |
FO細胞，小鼠骨髓瘤細胞 3T6-Swiss albino(胚胎成纖維細胞) 人臍靜脈內(nèi)皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304] | 兔脾淋巴原代細胞酸化葡萄糖合成酶1抗體 |
人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82] | PK-15(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured) |
THBD Others Rat 大鼠 Thrombomodulin / THBD 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H129人視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
TNFSF11 Protein Mouse 重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) | 酸化腫瘤血管內(nèi)皮標志物8抗體 |
主導控制樣蛋白1抗體 | L132 人肺上皮細胞 |
酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 | 腫瘤抑制基因P53蛋白抗體（野生型P53） |
酸化腫瘤血管內(nèi)皮標志物8抗體 | GDF15 Protein Human 重組人 GDF-15 蛋白 (Fc 標簽) |
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