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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔胚胎肝母采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔胚胎肝母經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔胚胎肝母原代細胞 | 組織來源 | 胚胎；肝臟 |
英文名稱 | Rabbit Embryonic Hepatoblast Cells | 貨號 | YS-01X8406 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔胚胎肝母細胞分離自胚胎肝組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置,，在右側(cè)橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方,。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層細胞（一種多潛能干細胞）。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠,，前腸的原始上皮細胞接觸心肌中胚層后快速增殖,，形成肝原基。大約1d后,，原始上皮細胞侵入原始橫膈,，繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細胞，這些細胞先表達 AFP 然后是ALb,。幼稚肝臟上皮細胞很快成熟,，并進一步分化為肝細胞或膽管上皮細胞，因為此期的肝臟上皮細胞其具有向這兩種肝實質(zhì)細胞雙向分化的潛能,，所以又稱肝母細胞,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔胚胎肝母細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14 | FAM59A蛋白抗體 |
高爾基體外周膜蛋白1抗體 | 三酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體 |
ADCK5蛋白抗體 | 原酶(纖維介素)抗體 |
錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 | FAM59A蛋白抗體 |
原酶(纖維介素)抗體 | 三酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體 |
CD300A Others Human 人 CD300A 人細胞裂解液 (陽性對照) | ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肝細胞;HL-7702[L-02] | MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | COLGALT2 Others Human 人 GLT25D2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 人氣管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0901 | 兔胚胎肝母原代細胞原酶(纖維介素)抗體 |
TNFSF12 Others Rat 大鼠 TNFSF12 人細胞裂解液 (陽性對照) | 恒河猴腎細胞;RM-2 |
犬腎細胞;MDCK(NBL-2) | A673(人橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R011大鼠肺大動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL 人正常肺上皮細胞;BEAS-2B |
T-24細胞，膀胱變移細胞癌細胞 人巨細胞白血病細胞株,Mo7e細胞 人肺腺癌細胞;Calu-3 | Fbxw7蛋白抗體 |
錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 | TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
高爾基體外周膜蛋白1抗體 | ADCK5蛋白抗體 |
Fbxw7蛋白抗體 | CD300A Others Human 人 CD300A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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