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兔胚胎肝母原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-16 11:42:51瀏覽次數(shù):74

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8406 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔胚胎肝母原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶 Human 人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 食管平滑肌細(xì)胞 大鼠原代大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
細(xì)胞屬性:

兔胚胎肝母原代細(xì)胞

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚胎肝母采用膠原酶消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚胎肝母經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

產(chǎn)品名稱

兔胚胎肝母原代細(xì)胞

組織來源

胚胎;肝臟

英文名稱

Rabbit Embryonic   Hepatoblast Cells

貨號(hào)

YS-01X8406

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

兔胚胎肝母原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

兔胚胎肝母細(xì)胞分離自胚胎肝組織,;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,,為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官,。肝臟起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層細(xì)胞(一種多潛能干細(xì)胞),。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠,前腸的原始上皮細(xì)胞接觸心肌中胚層后快速增殖,,形成肝原基,。大約1d后,原始上皮細(xì)胞侵入原始橫膈,,繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細(xì)胞,,這些細(xì)胞先表達(dá) AFP 然后是ALb,。幼稚肝臟上皮細(xì)胞很快成熟,并進(jìn)一步分化為肝細(xì)胞或膽管上皮細(xì)胞,,因?yàn)榇似诘母闻K上皮細(xì)胞其具有向這兩種肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞雙向分化的潛能,,所以又稱肝母細(xì)胞。

培養(yǎng)信息:

兔胚胎肝母原代細(xì)胞

包被條件:鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO25%

兔胚胎肝母細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔胚胎肝母原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔胚胎肝母原代細(xì)胞

1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

公司產(chǎn)品:兔胚胎肝母原代細(xì)胞

小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14

FAM59A蛋白抗體

高爾基體外周膜蛋白1抗體

三酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體

ADCK5蛋白抗體

原酶(纖維介素)抗體

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體

FAM59A蛋白抗體

原酶(纖維介素)抗體

三酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體

CD300A Others Human CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

ARSA Others Human ARSA / Arylsulfatase A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02]

MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin)   人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

COLGALT2 Others Human GLT25D2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1 人氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

IFNB1 Others Human Ierferon beta / IFN-beta / IFNB CHO細(xì)胞裂解液   (陽性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901

兔胚胎肝母原代細(xì)胞原酶(纖維介素)抗體

TNFSF12 Others Rat 大鼠 TNFSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

恒河猴腎細(xì)胞;RM-2

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R011大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B

T-24細(xì)胞,膀胱變移細(xì)胞癌細(xì)胞 人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株,Mo7e細(xì)胞 人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3

Fbxw7蛋白抗體

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體

TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

高爾基體外周膜蛋白1抗體

ADCK5蛋白抗體

Fbxw7蛋白抗體

CD300A Others Human CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

 



操作步驟:

兔胚胎肝母原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min,。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,每次3min,。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min,。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,,每次3min,。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。

11. 鏡檢觀察。



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