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兔尿道上皮原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-16 11:34:31瀏覽次數(shù):46

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8400 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔尿道上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Rattus 人腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠牙細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 心肌成纖維細(xì)胞 大鼠原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
細(xì)胞屬性:

兔尿道上皮原代細(xì)胞

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔尿道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的兔尿道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

產(chǎn)品名稱

兔尿道上皮原代細(xì)胞

組織來源

尿道

英文名稱

Rabbit Urethral   Epithelial Cells

貨號

YS-01X8400

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

兔尿道上皮原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

兔尿道上皮細(xì)胞分離自尿道管組織,;尿道是從膀胱通向體外的管道,。尿道上皮細(xì)胞主要功能:①尿道上皮細(xì)胞排列在膀胱表面,它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細(xì)胞組成,;②上皮細(xì)胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸,,它們具有多種防御機(jī)制來阻止病原體粘著,保持泌尿器溶解物的不滲透性,;③膀胱上皮細(xì)胞表達(dá)雌激素α,、β受體,上皮生長因子受體和纖維母細(xì)胞生長因子受體,,在損傷和感染時(shí),這些受體對膀胱上皮細(xì)胞起著重要作用,;④能釋放許多細(xì)胞因子,、免疫系統(tǒng)介質(zhì)。

培養(yǎng)信息:

兔尿道上皮原代細(xì)胞

包被條件:鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO25%

兔尿道上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔尿道上皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔尿道上皮原代細(xì)胞

1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

公司產(chǎn)品:兔尿道上皮原代細(xì)胞

MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞,PT67細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1](骨髓瘤細(xì)胞)

酸化細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體

酸化谷受體2抗體

轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEF3抗體

腫瘤異常甲基化蛋白2抗體

酸化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體

病毒抗體

酸化細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體

酸化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體

轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEF3抗體

人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7e

PA319 人大腸癌細(xì)胞

CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)

CL-0397NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M IE8

原代軟骨細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml

兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株,,293001B細(xì)胞 NCI-H520 [H520](人肺癌細(xì)胞)

兔尿道上皮原代細(xì)胞酸化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ALDH3A1 Others Human ALDH3A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CoC1/DDP細(xì)胞,,CoC1細(xì)胞耐藥亞株 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7712

人顱骨成骨細(xì)胞HCO

SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系

酸化整合素β4抗體

病毒抗體

Daudi(人淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

酸化谷受體2抗體

腫瘤異常甲基化蛋白2抗體

酸化整合素β4抗體

人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7e

 



操作步驟:

兔尿道上皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片,。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透,。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min,。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán),。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。

11. 鏡檢觀察,。



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