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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YS-01X7224 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
詳細(xì)介紹
兔尿道平滑肌原代細(xì)胞
兔尿道平滑肌細(xì)胞分離自尿道管組織,；尿道是從膀胱通向體外的管道,。起自膀胱的尿道內(nèi)口，止于尿道外口,，行程中通過前列腺部,、膜部和陰莖海綿體部，尿道在尿道膜部有一環(huán)橫行紋肌構(gòu)成的括約肌,，稱為尿道外括約肌,，由意識控制。尿道有三個(gè)解剖上的較狹部和膨大部,，前者分別位于外口,、膜部和內(nèi)口，后者位于舟狀窩、球部和前列腺部,。尿道壁為粘膜層,、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面,，還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體,。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部)，一部分為多列或復(fù)層柱狀上皮,，在有尿道海綿體的一部分尿道,，主要為復(fù)層柱狀上皮，在皺襞上也有單層柱狀上皮,。特別在舟狀窩內(nèi)有許多環(huán)狀細(xì)胞,，舟狀窩的遠(yuǎn)端部開始有未角化的復(fù)層鱗狀上皮。粘膜下層血液豐富,，主要為結(jié)締組織,。肌肉層有縱行肌和外環(huán)形肌。
英文名稱 | Rabbit Urethral Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 尿道組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7224 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔尿道平滑肌細(xì)胞
組織來源：尿道組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次,；
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔尿道平滑肌采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔尿道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠黑色素瘤瘤株;B16 | FAM154A蛋白抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體52抗體 | 過氧化物酶?；?span>A氧化酶1抗體 |
伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體 | FRA2/FOSL2抗體 |
甘油酯激酶粒體抗體 | FAM154A蛋白抗體 |
FRA2/FOSL2抗體 | 過氧化物酶?；?span>A氧化酶1抗體 |
CKMT1A Others Human 人 CKMT1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人肝星形細(xì)胞RNAHHSteC miRNA5 μg | TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EPHB3 Others Mouse 小鼠 EPHB3 / HEK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | WWP2 Others Human 人 WWP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 EVI2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0905 | 兔尿道平滑肌原代細(xì)胞FRA2/FOSL2抗體 |
KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16 |
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | PT67細(xì)胞，小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞 人癌細(xì)胞,MCF-7/ER36細(xì)胞 小鼠皮質(zhì)元MN-c |
IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 脆性X相關(guān)蛋白1抗體 |
甘油酯激酶粒體抗體 | CA14 Others Mouse 小鼠 CA14 / Car14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
G蛋白偶聯(lián)受體52抗體 | 伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體 |
脆性X相關(guān)蛋白1抗體 | CKMT1A Others Human 人 CKMT1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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