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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔腦膜成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腦膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔腦膜成纖維原代細胞 | 組織來源 | 腦膜 |
英文名稱 | Rabbit Meningeal Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X8398 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔腦膜細胞分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜,，一共有三層,，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜,。硬腦膜,，是一厚而堅韌的雙層膜，外層是顱骨內(nèi)面的骨膜,，僅疏松地附于顱蓋,，特別是在枕部與顳部附著更疏松，稱為骨膜層,。蛛網(wǎng)膜是一層半透明的膜,，位于硬腦膜深部，其間有潛在性腔隙為硬腦膜下隙,。軟腦膜是緊貼于腦表面的一層透明薄膜,，并伸入溝裂。在腦室壁的某些部位,，軟腦膜及其血管與室管膜上皮共同形成脈絡組織,。脈絡組織中的血管反復分支成叢，突入腦室形成脈絡叢,。腦膜細胞圍繞著大腦,，參與中樞系統(tǒng)的正常發(fā)育,，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質(zhì),、組織放射狀膠質(zhì)細胞網(wǎng)絡和小腦皮層分層結(jié)構。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右,；1-2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔腦膜成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1 | FRMD3蛋白抗體 |
GADD153抗體 | 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白3抗體（半和絲富含核蛋白1） |
心肌錨蛋白重復結(jié)構域1抗體 | 肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體 |
血管生成素樣蛋白3抗體 | FRMD3蛋白抗體 |
肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體 | 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白3抗體（半和絲富含核蛋白1） |
CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD70 Others Human 人 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肝永生化細胞;THLE-3 | 大鼠腦膜細胞(RMC)(5×105) |
RSC96(大鼠雪旺細胞) 5×106cells/瓶×2 人 SLC27A4 / FATP4 人細胞裂解液 (陽性對照) | PGF Others Mouse 小鼠 PIGF / PLGF 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0923 人腦動脈血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | HCAEC人冠狀動脈內(nèi)皮細胞 HCAEC in human coronary artery endothelial cells ECM(Sicencell Cat#1001) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0907 | 兔腦膜成纖維原代細胞肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體 |
T24人膀胱移行細胞癌細胞 T24 human bladder ansitional cell carcinoma cell 1640+10% FBS | 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE) |
JAR 人胎盤絨毛癌細胞 | LILRB3 Others Mouse 小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | 脆性X相關蛋白樣2抗體 |
血管生成素樣蛋白3抗體 | 小鼠胚胎成纖維細胞;PA317 小鼠小腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
GADD153抗體 | 心肌錨蛋白重復結(jié)構域1抗體 |
脆性X相關蛋白樣2抗體 | CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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