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詳細(xì)介紹
兔毛囊原代細(xì)胞
兔毛囊細(xì)胞分離自皮膚毛囊組織,；毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮,。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,，中心是一根毛發(fā),，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,，附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,，毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織,。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,，除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來,。毛囊開口起始于皮膚表面,，而每個(gè)毛囊又和一個(gè)或多個(gè)腺胞相連。每個(gè)腺胞解離成富含脂質(zhì)的物質(zhì),，卻又通過一個(gè)共同和毛囊相通連的皮脂腺導(dǎo)管將分泌物運(yùn)送到皮膚表面排出,。
英文名稱 | Rabbit Hair Follicle Cells | 組織來源 | 毛囊 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8394 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔毛囊細(xì)胞
組織來源：毛囊
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔毛囊細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔毛囊采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔毛囊經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠畸胎瘤細(xì)胞;F9 | FRMD4A蛋白抗體 |
糖基0脂酰肌醇錨連接蛋白1抗體 | 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 |
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 | FAM29蛋白抗體 |
自噬體ATG16L2蛋白抗體 | FRMD4A蛋白抗體 |
FAM29蛋白抗體 | 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 |
SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CD274 Others Human 人 PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人肝臟星形細(xì)胞總RNAHHSteC NA | JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | STAT6 Others Human 人 STAT6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919 人成骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 1590細(xì)胞,，人癌細(xì)胞系 小鼠淋巴瘤,EL-4細(xì)胞 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909 | 兔毛囊原代細(xì)胞FAM29蛋白抗體 |
U-87MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS | 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE) |
皮膚肥大細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | LAYN Others Cynomolgus 食蟹猴 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞) | 脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 |
自噬體ATG16L2蛋白抗體 | 急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104 大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
糖基0脂酰肌醇錨連接蛋白1抗體 | 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 |
脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 | SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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