詳細(xì)介紹
兔毛囊原代細(xì)胞
兔毛囊細(xì)胞分離自皮膚毛囊組織,;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮,。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,,中心是一根毛發(fā),,立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,,附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織,。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來,。毛囊開口起始于皮膚表面,,而每個(gè)毛囊又和一個(gè)或多個(gè)腺胞相連。每個(gè)腺胞解離成富含脂質(zhì)的物質(zhì),,卻又通過一個(gè)共同和毛囊相通連的皮脂腺導(dǎo)管將分泌物運(yùn)送到皮膚表面排出,。
英文名稱 | Rabbit Hair Follicle Cells | 組織來源 | 毛囊 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8394 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔毛囊細(xì)胞
組織來源:毛囊
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔毛囊細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔毛囊采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔毛囊經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠畸胎瘤細(xì)胞;F9 | FRMD4A蛋白抗體 |
糖基0脂酰肌醇錨連接蛋白1抗體 | 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 |
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 | FAM29蛋白抗體 |
自噬體ATG16L2蛋白抗體 | FRMD4A蛋白抗體 |
FAM29蛋白抗體 | 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 |
SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CD274 Others Human 人 PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人肝臟星形細(xì)胞總RNAHHSteC NA | JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | STAT6 Others Human 人 STAT6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919 人成骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 1590細(xì)胞,人癌細(xì)胞系 小鼠淋巴瘤,EL-4細(xì)胞 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909 | 兔毛囊原代細(xì)胞FAM29蛋白抗體 |
U-87MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS | 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE) |
皮膚肥大細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | LAYN Others Cynomolgus 食蟹猴 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞) | 脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 |
自噬體ATG16L2蛋白抗體 | 急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104 大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
糖基0脂酰肌醇錨連接蛋白1抗體 | 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 |
脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 | SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。