化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
兔脈絡(luò)膜黑色素原代細胞
兔脈絡(luò)膜黑色素細胞分離自眼球脈絡(luò)膜組織；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,，含有豐富血管和色素細胞,，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過體傳到后極部時,，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色,，圍繞視乳頭部有照膜,，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū),。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織,、小血管和毛細血管組成,，軟而薄，棕紅色,，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,，其含有的豐富色素起遮光暗房作用,。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及體，并有遮光作用,，使反射的物象清楚,。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用，對整個視覺有調(diào)節(jié)作用,。續(xù)連于睫狀體后方,，含豐富的血管和色素細胞，有營養(yǎng)和遮光作用,。
英文名稱 | Rabbit Choroidal Melanocyte Cells | 組織來源 | 脈絡(luò)膜 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8391 |
細胞形態(tài) | 長梭形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔脈絡(luò)膜黑色素細胞
組織來源：脈絡(luò)膜
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：長梭形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔脈絡(luò)膜黑色素細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔脈絡(luò)膜黑色素細胞先用蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化結(jié)合專用培養(yǎng)基篩選法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔脈絡(luò)膜黑色素經(jīng)Dopa染色檢測，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠漿細胞瘤;MPC-11 | FAM101A蛋白抗體 |
G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 | 有絲分裂激酶B抗體 |
雌二醇抗體 | MaFF相關(guān)蛋白抗體 |
芳基硫酸酯酶B抗體 | FAM101A蛋白抗體 |
MaFF相關(guān)蛋白抗體 | 有絲分裂激酶B抗體 |
EPHB3 Others Human 人 EphB3 / HEK2 (aa 585-998) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | EGF Others Human 人 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3) | MEN Others Mouse 小鼠 Meteorin / MEN 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 MN-c, 小鼠皮質(zhì)元 人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] | E7 Others Mouse 小鼠 E7 / -7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
OK(負鼠腎小管細胞) 5×106cells/瓶×2 人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL27 Others Human 人 IL27 / Ierleukin-27 CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0910 | 兔脈絡(luò)膜黑色素原代細胞MaFF相關(guān)蛋白抗體 |
人骨骼肌細胞 (HSkMC)( 5×105 ) | 正常小鼠Sertoli細胞;TM4 |
犬腎細胞;MDCK(NBL-2) | A9(小鼠皮下結(jié)締組織細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R019大鼠腮腺細胞培養(yǎng)基100mL 人胚肺成纖維細胞;MRC-5 |
HCT-8細胞,，人結(jié)腸腺癌細胞 人黑色素瘤細胞,HME4細胞 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T | 酸化酸膜抗體 |
芳基硫酸酯酶B抗體 | 20. 細胞系統(tǒng) |
G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 | 雌二醇抗體 |
酸化酸膜抗體 | EPHB3 Others Human 人 EphB3 / HEK2 (aa 585-998) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
化工儀器網(wǎng)