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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔卵泡顆粒采用先機械分離，而后膠原酶消化,，后差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔卵泡顆粒經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔卵泡顆粒原代細胞 | 組織來源 | 卵巢 |
英文名稱 | Rabbit Follicle Granulosa Cells | 貨號 | YS-01X8389 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔卵泡顆粒細胞（卵巢顆粒細胞）分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官,，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素,。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化）,，呈葡萄狀,，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色,，卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,，它的外表有一層上皮組織,，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質,。皮質位于卵巢的周圍部分,，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于中央,，由疏松結締組織構成,，其中有許多血管、淋巴管和。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,，其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動,、發(fā)育、排卵,、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動,。卵巢顆粒細胞是卵泡內的大細胞群，也是主要的功能細胞,，卵泡發(fā)育的顯著標志之一就是顆粒細胞迅速生長及增殖,，而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞凋亡引起，尤其在卵泡發(fā)育后期,，此外,，顆粒細胞還與卵泡膜細胞共同完成卵巢激素的合成，維持著有利于卵母細胞生長和成熟的微環(huán)境,。細胞形狀呈圓形或橢圓形,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
小鼠漿細胞瘤;MPC-11 | FAM102B蛋白抗體 |
富含GC啟動子結合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體 | 溶血0脂酰基轉移酶抗體 |
細胞分裂周期蛋白16抗體 | 7抗體 |
γ氨基轉氨酶抗體 | FAM102B蛋白抗體 |
7抗體 | 溶血0脂?；D移酶抗體 |
PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細胞裂解液 (陽性對照) | 穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E 人腎皮層上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人股骨成骨細胞HO-f | VP0 Others Human Eerovirus 71 人腸道病毒71型 VP0 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
BMPR1A Others Human 人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 人細胞裂解液 (陽性對照) | PTH Others Human 人 PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD34 Others Human 人 CD34 人細胞裂解液 (陽性對照) | 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 胰腺癌細胞,，CFPAC-1細胞 Ranca細胞，小鼠腎癌細胞 |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0911 | 兔卵泡顆粒原代細胞7抗體 |
人導管癌細胞;ZR-75-30 大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk |
22RV1 人前列腺癌細胞 | SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 酸化DNA損傷修復基因XRCC9抗體 |
γ氨基轉氨酶抗體 | 小鼠子細胞;U14 小鼠肝竇內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
富含GC啟動子結合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體 | 細胞分裂周期蛋白16抗體 |
酸化DNA損傷修復基因XRCC9抗體 | PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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