詳細(xì)介紹
兔卵巢微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
兔卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),,呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,,卵泡呈黃色,,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能,。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織,。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成,;髓質(zhì)位于中央,,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管,、淋巴管和,。微血管又稱毛細(xì)血管。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管,。介于微動脈和微靜脈之間,。平均直徑7-9微米,數(shù)量極多,,成網(wǎng)狀分布,。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米,?;ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織,其中有纖維細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等,。細(xì)的微血管由一個內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,較粗的微血管由2-3個內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織,、組織和結(jié)締組織中的微血管,內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),,稱連續(xù)微血管,。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān),。近年來血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥,、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn),,不同來源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征,、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別,而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞,,它們又存在器官和組織的特異性,。
英文名稱 | Rabbit Ovarian Microvascular endothelial Cells | 組織來源 | 卵巢 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8387 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源:卵巢
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔卵巢微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔卵巢微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞;CT26.WT [CT26WT] | FAM104B蛋白抗體 |
血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體 | 酸化Ack1抗體 |
三酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白9抗體 | 成纖維細(xì)胞生長因子12抗體 |
共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 | FAM104B蛋白抗體 |
成纖維細(xì)胞生長因子12抗體 | 酸化Ack1抗體 |
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人骨骼肌成肌細(xì)胞cDNAHSkMM cDNA | GPNMB Others Human 人 GPNMB / HGFIN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | THY1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD90 / THY-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SLC3A2 Others Human 人 CD98 / SLC3A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0911 | 兔卵巢微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞成纖維細(xì)胞生長因子12抗體 |
VTN Others Mouse 小鼠 Vionectin / VTN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CL-0319B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (His 標(biāo)簽) | VERO細(xì)胞衍生株;SVP 大鼠癌細(xì)胞,,SHZ-88細(xì)胞 QGY-7701(肝癌細(xì)胞) |
BTLA Others Mouse 小鼠 BTLA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 細(xì)絲蛋白A抗體 |
共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 | F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體 | 三酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白9抗體 |
細(xì)絲蛋白A抗體 | CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。