詳細(xì)介紹
兔顱蓋造骨原代細(xì)胞
兔顱蓋造骨細(xì)胞分離自顱骨組織;造骨細(xì)胞(osteoblast)亦稱成骨細(xì)胞,。是參與骨組織形成的細(xì)胞,。顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外,,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),起著保護(hù)和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用,。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內(nèi)有顱腔,,容納腦,,共8塊。面顱為顱的前下部分,,包含眶,、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu),,構(gòu)成面部的支架,,共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,,負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建,,骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域,,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),,形成骨吸收陷窩,;其后,成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,,分泌骨基質(zhì),,骨基質(zhì)礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制,、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段,。
英文名稱 | Rabbit Calvarial Osteoblast Cells | 組織來源 | 顱骨 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8384 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔顱蓋造骨細(xì)胞
組織來源:顱骨
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形,、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔顱蓋造骨細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔顱蓋造骨經(jīng)ALP染色檢測,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929] | FRMD6蛋白抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體77抗體 | 酸化有絲分裂激酶A抗體 |
活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫氨酶抗體 | 胰腺衍生因子抗體 |
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體 | FRMD6蛋白抗體 |
胰腺衍生因子抗體 | 酸化有絲分裂激酶A抗體 |
PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人骨骼肌成肌細(xì)胞裂解物HSkMML | VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人臍帶靜脈平滑肌細(xì)胞 (HUVSMC)( 5×105 ) |
ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞,,人卵巢癌細(xì)胞 人支氣管上皮細(xì)胞,HBE細(xì)胞 腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919 | 兔顱蓋造骨原代細(xì)胞胰腺衍生因子抗體 |
A875細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 阪崎腸桿菌 人紅系白血病細(xì)胞;TF-1 | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620] |
EC-304? 人血管內(nèi)皮細(xì)胞 | LY96 Others Mouse 小鼠 LY-96 / ESOP-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Hs 578T(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 正常細(xì)胞 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A | 酸化載脂蛋白A1抗體 |
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體 | 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC 白血病細(xì)胞,,L1210細(xì)胞 SH2細(xì)胞,,小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 |
G蛋白偶聯(lián)受體77抗體 | 活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫氨酶抗體 |
酸化載脂蛋白A1抗體 | PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。