詳細介紹
兔晶狀體上皮原代細胞
兔晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織,;晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,,僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物,,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開;因而,,晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無和血管組織的干擾,,又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染,保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性,。晶狀體上皮細胞主要負責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中,,晶狀體上皮細胞分化和成熟,,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,,自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞,,并終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明,,晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控,,包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,,呈單層生長,、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞,,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),,體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。
英文名稱 | Rabbit Lens Epithelial Cells | 組織來源 | 晶狀體組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7015 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔晶狀體上皮細胞
組織來源:晶狀體組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔晶狀體上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔晶狀體上皮經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
T-47D人管癌細胞 T-47D human breast duct carcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 酸化糖原合酶激酶-3β抗體 |
酸化鈣介質(zhì)素抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體 |
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體 | 酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 |
軸突導(dǎo)向因子SEMA6D抗體 | 酸化糖原合酶激酶-3β抗體 |
酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體 |
TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白 (His 標簽) | 小鼠畸胎瘤細胞;P19 |
Acc-3細胞,,涎腺腺樣囊性癌細胞 人胃癌細胞,BSG823細胞 犬胸腺細胞;cf2Th | tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 |
GBC-SD 人膽囊癌細胞 | TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標簽) |
MCF-7 人癌細胞 | CL-0140LLC(小鼠肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
RKO人結(jié)腸腺癌細胞 RKO human colon adenocarcinoma cells 1640+10%FBS | 兔晶狀體上皮原代細胞酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 |
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 | 小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
Promocell C-23061 Skeletal Muscle CellDiffereiation Medium, 骨骼肌細胞分化培養(yǎng)基(即用型) 500ml | IL17A Protein Mouse 重組小鼠 IL17 / IL17A 蛋白 |
人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | 酸化原基因蛋白18抗體 |
軸突導(dǎo)向因子SEMA6D抗體 | 人少突膠質(zhì)前體細胞-懸浮生長裂解物HOPC-os L |
酸化鈣介質(zhì)素抗體 | 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體 |
酸化原基因蛋白18抗體 | TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白 (His 標簽) |