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詳細(xì)介紹
兔脊髓星形膠質(zhì)原代細(xì)胞
兔脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自脊髓組織,；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的結(jié)構(gòu),，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù),；是源自腦的中樞系統(tǒng)延伸部分,。中樞系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的信息,。人和脊椎動物中樞系統(tǒng)的一部分,，在椎管里面，上端連接延髓,，兩旁發(fā)出成對的,，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟,。脊髓的內(nèi)部有一個H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由細(xì)胞構(gòu)成,；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),，主要由有髓纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞,。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的（稱為脊）分布到全身皮膚,、肌肉和內(nèi)臟器官,。脊髓是周圍與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞,。按脊的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),，31對脊就是由不同的脊椎發(fā)出的。系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是元,，即細(xì)胞,，其大小和外觀在中樞系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突,、軸突,。胞體又叫核周體，內(nèi)含絲,、微管,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核,。一些大元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,，在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀，稱為尼氏小體,。樹突和軸突是元的突起,，能在元之間傳遞電沖動，突起的大小和形態(tài)各不相同,，很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別,。
英文名稱 | Rabbit Spinal Cord Astrocyte Cells | 組織來源 | 脊髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8372 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞
組織來源：脊髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脊髓星形膠質(zhì)采用消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脊髓星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
LLC-RFP-puro小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC-RFP-puro mice with Lewis lung cancer cells DMEM+10%Hyclone 滅活血清+2ug/ml puromycin | 酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 |
酸化富含的酪激酶2抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子LMCD1抗體 |
腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 | 酸化0脂酰肌醇激酶抗體 |
軸突蛋白4/少突膠質(zhì)細(xì)胞抗體 | 酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 |
酸化0脂酰肌醇激酶抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子LMCD1抗體 |
TNFSF4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- |
NCI-H1650細(xì)胞,，人肺支氣管癌細(xì)胞 小鼠前列腺癌細(xì)胞,RM-1細(xì)胞 CM-R031大鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | Raji(人Butt's淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
CM-H086人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1 |
CNE-2Z 人鼻咽癌母系細(xì)胞 | 人胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passage |
6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系 骨髓瘤,P3-NS-1/1-Ag4.1細(xì)胞 MRC-5(人正常胚肺成纖維細(xì)胞) | 兔脊髓星形膠質(zhì)原代細(xì)胞酸化0脂酰肌醇激酶抗體 |
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4 | VDR Others Mouse 小鼠 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞，HEL299細(xì)胞 PT67細(xì)胞,，鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞 | 人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞HACC |
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 | 酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪激酶抗體 |
軸突蛋白4/少突膠質(zhì)細(xì)胞抗體 | HL-7702(人肝正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
酸化富含的酪激酶2抗體 | 腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 |
酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪激酶抗體 | TNFSF4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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