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兔肌源性干原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-16 10:31:42瀏覽次數(shù):80

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7080 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔肌源性干原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代前列腺干細(xì)胞 大鼠上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化) 英文名稱: PC-12(低分化) 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 真皮淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠原代腎小球系膜細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔肌源性干原代細(xì)胞

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌源性干采用膠原酶-蛋白酶-聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心,、差速貼壁法,,后通過肌源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌源性干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

產(chǎn)品名稱

兔肌源性干原代細(xì)胞

組織來源

骨骼肌組織

英文名稱

Rabbit Myogenic   Stem Cells

貨號

YS-01X7080

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

細(xì)胞簡介:

兔肌源性干細(xì)胞分離自肌肉組織;肌源性干細(xì)胞(MDSCs)屬于成體多能干細(xì)胞,,具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激,,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼,、軟骨,、平滑肌和細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類型,;作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞,,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點(diǎn),;近年來,肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視,。需注意的是,肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中,,只是成熟組織的很少部分細(xì)胞;平時處于靜止?fàn)顟B(tài),,在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時才會激活;并且隨著年齡的增加,,所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,,而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進(jìn)行。肌源性干細(xì)胞的體外擴(kuò)增對細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要,。對肌源性干細(xì)胞的擴(kuò)增研究發(fā)現(xiàn),EGF,、FGF-2SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂周期,從而刺激細(xì)胞增生,。更重要的是,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴(kuò)增可以通過自我更新不刺激細(xì)胞分化,,從而保持干細(xì)胞表型。

兔肌源性干原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

兔肌源性干原代細(xì)胞

包被條件 PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基 FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%CO2,,5%

兔肌源性干原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔肌源性干原代細(xì)胞

1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

操作步驟:

兔肌源性干原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min,。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,,每次3min,。

5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,,每次3min,。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:兔肌源性干原代細(xì)胞


rEPC,,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓   正常人細(xì)胞,Hs 181.Tes細(xì)胞 LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)

酸化髓樣細(xì)胞白血病-1抗體

酸化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體

轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體

腫瘤壞死因子受體超家族成員9抗體

酸化0脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗體

軸突蛋白1β/Neurexin   1β抗體

酸化髓樣細(xì)胞白血病-1抗體

酸化0脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗體

轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]

豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3

SPC-A1細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞 綠猴腎細(xì)胞,Vero細(xì)胞 CM-M034小鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

Sf-9(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CM-H066人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細(xì)胞

兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF

CACO-2細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞,RPMI-8226細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

兔肌源性干原代細(xì)胞酸化0脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗體

A2780(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

PLAU Others Human Urokinase / PLAU (activated by ypsin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1 結(jié)腸腺癌細(xì)胞,,LS 174T細(xì)胞 RPC細(xì)胞,大鼠垂體細(xì)胞

人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞HSkMSC

RN-h, 大鼠海馬趾元

酸化原癌基因c-Jun抗體

軸突蛋白1β/Neurexin   1β抗體

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]

酸化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體

腫瘤壞死因子受體超家族成員9抗體

酸化原癌基因c-Jun抗體

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]

 


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