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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的兔肌腱干采用膠原酶,、蛋白酶混合消化法并通過肌腱干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的兔肌腱干經CD44免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔肌腱干原代細胞 | 組織來源 | 肌腱組織 |
英文名稱 | Rabbit Tendon Stem Cells | 貨號 | YS-01X7021 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔肌腱干細胞分離自肌腱組織,；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結締組織,，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動,。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構成,，色紅質軟,，有收縮能力,，肌腱由致密結締組織構成，色乳白較硬,，沒有收縮能力,。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀,，闊肌的肌腱闊而薄,，呈膜狀，又叫腱膜,。此處的肌腹即為通常所說的紅肌,，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量,、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細胞（TSCs）是一種來源于肌腱組織的間充質干細胞,，其具有多向分化潛能,，并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時該細胞群具有克隆形成能力,、自我更新及多向分化潛能等干細胞的普遍特性,。肌腱干細胞可以被誘導向脂肪細胞、軟骨樣細胞,、骨細胞分化,；在裸鼠模型中，肌腱干細胞還可以形成肌腱樣組織,，軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等,。相比骨髓間充質干細胞而言，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,，軟骨相關基因和肌腱相關基因表達更高,，具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力,，因此可以作為組織工程中的種子細胞,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產品：
小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12 | 酸化酪蛋白激酶3抗體 |
G蛋白偶聯受體125抗體 | 脊髓小腦失調癥蛋白1抗體 |
肺α/β水解酶蛋白3抗體 | 成纖維細胞生長因子10抗體 |
酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體 | 酸化酪蛋白激酶3抗體 |
成纖維細胞生長因子10抗體 | 脊髓小腦失調癥蛋白1抗體 |
LYG1 Others Human 人 Lysozyme G-like 1 / LYG1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人海馬趾細胞HN-h | LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人羊膜細胞;HA 人淋巴血管內皮細胞培養(yǎng)基 100mL | REG1B Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1B / PSPS2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ESAM Others Human 人 ESAM 人細胞裂解液 (陽性對照) | TGFBR2 Others Human 人 TGFβR2 / TGFR2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYB | 兔肌腱干原代細胞成纖維細胞生長因子10抗體 |
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細胞裂解液 (陽性對照) | Daudi 人成巨核細胞白血病細胞 |
CNE1, 人鼻咽癌細胞系 Human | HIT-T15細胞，倉鼠beta胰島細胞 人癌細胞,MCF-7B細胞 小鼠胚胎成纖維細胞MEF |
RPS6KA6 Others Human 人 RSK4 / RPS6KA6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | α-L巖藻糖苷酶抗體 |
酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體 | BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
G蛋白偶聯受體125抗體 | 肺α/β水解酶蛋白3抗體 |
α-L巖藻糖苷酶抗體 | LYG1 Others Human 人 Lysozyme G-like 1 / LYG1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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