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詳細介紹
兔冠狀動脈內(nèi)皮原代細胞
兔冠狀動脈內(nèi)皮細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型,、均衡型,、左優(yōu)勢型,。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,，發(fā)自左主動脈竇,，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后,，立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合,。冠狀動脈內(nèi)皮細胞呈單層扁平分布,，是一薄層的專門上皮細胞，它形成冠狀動脈的內(nèi)壁,，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口,。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管,。
英文名稱 | Rabbit Coronary Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 冠狀動脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7768 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔冠狀動脈內(nèi)皮細胞
組織來源：冠狀動脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔冠狀動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔冠狀動脈內(nèi)皮采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔冠狀動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
RN-h, 大鼠海馬趾元 正常人細胞,，Hs 1.Tes細胞 MDBK (NBL-1)(牛腎細胞) | NAIP(Human neuronal apoptosis inhibitory protein) ELISA Kit 人元凋亡抑制蛋白 96T |
Rarres3： 酸受體應(yīng)答蛋白3抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh PTOV1 前列腺高表達蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HERG/FITC 熒光素標記特異性離子通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C7orf72： 7號染色體開放閱讀框72抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BOLA2 BOLA2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-CXCR3/CD183(rat,mo) /FITC 熒光素標記兔抗大、小鼠細胞表面趨化因子受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
成纖維細胞生長因子受體3抗體 Anti-FGFR3 0.1ml | phospho-Akt(Thr308)： 0酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml |
人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205 | 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞;C6 |
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡(luò)膜血管細胞培養(yǎng)基 100mL | HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Human |
人肺大靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | ANGPTL2 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 蛋白 (Fc 標簽) |
HGC-27人胃癌細胞 | CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細胞)5×106cells/瓶×2 |
A375細胞,，人惡性黑色素瘤細胞 糞腸球菌 人結(jié)直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480] | 兔冠狀動脈內(nèi)皮原代細胞C7orf72： 7號染色體開放閱讀框72抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 | HGC-27細胞,，人未分化胃癌細胞 人母細胞瘤細胞,BE(2)-M17細胞 恒河猴腎細胞;RM-1 |
MANF Others Human 人 MANF / ARMET 人細胞裂解液 (陽性對照) | LA795(小鼠肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2 | Kappa light chain/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GREB1 癌雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體 規(guī)格 0.1ml | 人少突膠質(zhì)前體細胞(懸浮生長)cDNAHOPC-os cDNA |
phospho-MEK1 (Ser385)： 0酸化原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml | Anti-M2-PK (pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
histon-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2bMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | 人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205 |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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