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兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞

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更新時間:2025-05-16 10:18:18瀏覽次數(shù):48

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7003 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代腦成纖維細胞 小鼠癌 英文名稱: EMT-6 人組織源細胞培養(yǎng)試劑盒 人組織源細胞培養(yǎng) 大鼠小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 晶狀體上皮細胞 大鼠原代小腦顆粒細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
細胞屬性:

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的兔關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合蛋白酶消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞

組織來源

關(guān)節(jié)軟骨組織

英文名稱

Rabbit Articular   Chondrocyte Cells

貨號

YS-01X7003

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞
細胞簡介:

兔關(guān)節(jié)軟骨細胞分離自關(guān)節(jié)軟骨組織,;關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,,表面光滑,、呈淡藍色、有光澤,,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,,同時當(dāng)受到壓力時候,,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用,。在這些纖維之間,,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,,這些軟骨細胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝,。關(guān)節(jié)軟骨沒有支配,也沒有血管,,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運動,,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,,所以關(guān)節(jié)運動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,,單個分布、體積較小,、呈橢圓形,,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,,細胞核圓形或卵圓形,、染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,,常見數(shù)量不一的脂滴,。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,,稱為同源細胞群,。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體,。在組織切片中,,關(guān)節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

培養(yǎng)信息:

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞

培養(yǎng)基 FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率 3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。

3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

公司產(chǎn)品:兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞

HFTF細胞,人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞   遲緩真桿菌/遲緩埃格特菌 小耳豬肺細胞;SEP-L2

Rhesus antibody Rh GDF8 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 規(guī)格 0.2ml

P I NP(Human procollagen I N-terminal   peptide) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原N端前肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

ILVBL: 乙酰乳酸合成酶蛋白抗體   0.2ml

PGE2 ELISA Kit 大鼠前列腺素E2 96T

Rhesus antibody Rh Renin 腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體 規(guī)格   0.1ml

Anti-Leptin receptor(long) /FITC 熒光素標記瘦素受體抗體()IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin   (Ser16) 0酸化原癌基因蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml

MHC I /RLA I (Rabbit major   histocompatibility complex I ) ELISA Kit 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類   96T

CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白

大鼠腸動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL

CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute   lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 滅活血清

EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標簽)

人胚肺二倍體細胞;KMB-17

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163

人小腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL

人肺泡上皮細胞裂解物HPAEpiCL

ECV304細胞,,人臍靜脈內(nèi)皮細胞株 人小細胞肺癌細胞,NCI-H345細胞 CL-0403NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞PGE2   ELISA Kit 大鼠前列腺素E2 96T

HGC-27 人胃癌細胞(未分化)

CA10 Others Human CA10 人細胞裂解液 (陽性對照)

PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H103胎兒真皮成纖維細胞培養(yǎng)基100mL

人羊膜細胞;WISH

Rhesus antibody Rh   APBA3/Mint3/X11gamma β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體   規(guī)格 0.2ml

beta IV Tubulin: 微管蛋白β4抗體 0.2ml

KM小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤瘤株;L

Anti-VEGF(Rabbit)/FITC 熒光素標記血管內(nèi)皮生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

PTK9: 蛋白酪酸激酶9抗體 0.2ml

Anti-CDK7/Cyclin H/MAT1 /FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白

 



操作步驟:

兔關(guān)節(jié)軟骨原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片,。

2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min,。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透,。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,,每次3min,。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min,。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,,每次3min,。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。

11. 鏡檢觀察。



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