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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔骨髓基質(zhì)采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔骨髓基質(zhì)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔骨髓基質(zhì)原代細胞 | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Rabbit Bone Marrow Stromal Cells | 貨號 | YS-01X8356 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔骨髓基質(zhì)細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌,、病毒等,；某些淋巴細胞能制造抗體。因此,，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓基質(zhì)細胞是一類具有多向分化潛能的干細胞，其中部分細胞有自我復(fù)制,、高度增殖和多向分化能力,，在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨,、膠質(zhì)細胞,、心肌、骨胳肌,、脂肪細胞,、血管內(nèi)皮細胞等間葉組織細胞轉(zhuǎn)化。骨髓基質(zhì)細胞在自然條件下主要分化為成骨細胞,，在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同,，其在成骨細胞與成脂細胞分化之間呈反向變化。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2,，5%
兔骨髓基質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
小鼠胚胎成纖維細胞MEF | Anti-Phospho-Tyk2 (Tyr1054/1055) 0酸化非受體酪蛋白激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2 96T | Anti-HAS/FITC 熒光素標記兔抗人血清白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thrap3/TRAP150 甲狀腺激素受體相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml | GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
FKBP52： 熱休克蛋白56抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Caspr2 軸突相關(guān)CNTP2蛋白抗體(少突膠質(zhì)細胞) 規(guī)格 0.2ml |
FOXF2： 叉頭蛋白F2抗體 0.2ml | T ELISA Kit 大鼠睪酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | A3(人T淋巴細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 子宮癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml |
人滑膜細胞cDNAHS cDNA | TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
GRN Others Human 人 Granulin / GRN 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD40LG Others Cynomolgus 食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
GDF15 Others Human 人 GDF-15 人細胞裂解液 (陽性對照) | TFPI Others Mouse 小鼠 TFPI / LACI / EPI 人細胞裂解液 (陽性對照) |
GC-1, 鼠精原細胞 | 兔骨髓基質(zhì)原代細胞GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
COL2A1 Others Human 人 COL2A1 (aa 1242-1487) 人細胞裂解液 (陽性對照) | RN-s, 大鼠紋狀體元 |
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞 | Beta-TC-6細胞,，小鼠胰腺癌beta細胞 人癌細胞,SKBr-2HL細胞 小鼠海馬星形膠質(zhì)細胞MA-h |
CDK4 Others Human 人 CDK4 / CMM3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-RAMP-1/FITC 熒光素標記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
OPG： 骨保護蛋白/護骨素抗體 0.1ml | 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
Sorcin： 抗藥蛋白抗體 0.2ml | phospho-CREB-1(Ser129)： 0酸化CREB-1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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