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詳細(xì)介紹
兔骨髓單核原代細(xì)胞
兔骨髓單核細(xì)胞分離自骨髓,；骨髓是機(jī)體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細(xì)菌、病毒等,；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓,。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大,，脂肪細(xì)胞增多,，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞,，在骨髓細(xì)胞中約占0.04%，被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞,，較外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高,、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多，純度高,，較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化效率高,。骨髓單核細(xì)胞（BMMNCs）是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細(xì)胞，它屬干細(xì)胞類型,。目前,，大多數(shù)研究用淋巴細(xì)胞分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞，近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。
英文名稱 | Rabbit Bone Marrow Monocyte Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7068 |
細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔骨髓單核細(xì)胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖,；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨髓單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
B95-8細(xì)胞，EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞 人大腸癌細(xì)胞,CL187/CCL187細(xì)胞 CM-H125人腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2 96T |
RNF128： 環(huán)指蛋白128抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PTP1B 蛋白酪0酸酶-1B 規(guī)格 0.1ml |
Anti-HER3/ErbB3 /FITC 熒光素標(biāo)記HER3受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CCDC47： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Bone sialoprotein 骨涎蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-CXC-R2/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
纖維母細(xì)胞生長因子受體1抗體 Anti-FGFR1 0.1ml | AKAP13： 蛋白激酶錨定蛋白13抗體 0.1ml |
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A | 大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HMy2.CIR人B淋巴母細(xì)胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS | FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] | 倉鼠腎細(xì)胞;HL-1 |
蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36 | CL-0127JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
VERO細(xì)胞,，非洲綠猴腎細(xì)胞 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H661細(xì)胞 CL-0420R 1610(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 兔骨髓單核原代細(xì)胞CCDC47： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76 | 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77 大鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0910 真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 牛腎細(xì)胞;MDBK |
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC | IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser) 兔抗粘附多肽抗體 規(guī)格 0.2ml | 人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg |
ETFB： 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體 0.2ml | Anti-M2-PK/PKM2 酸激酶-M2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘連蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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