詳細介紹
兔骨骼肌成纖維原代細胞
兔骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,,肌肉中的一種,,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,,肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,,其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,,有豐富的血管、淋巴分布,,在軀體支配下收縮或舒張,,進行隨意運動,。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小,、位置,、起止點,、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌、三角肌、梨狀肌等,。骨骼肌細胞呈纖維狀,,不分支,有明顯橫紋,核很多,,且都位于細胞膜下方,。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維,。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,,而暗帶染色較深,。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié),。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,,細胞呈纖維狀,不分支,,有明顯橫紋,,核很多,,且都位于細胞膜下方,,細胞多呈梭行,,具有一定的方向性,。
英文名稱 | Rabbit Skeletal Muscle Fibroblast Cells | 組織來源 | 骨骼肌 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7949 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔骨骼肌成纖維細胞
組織來源:骨骼肌
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔骨骼肌成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的tu骨骼肌成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔骨骼肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | CXCR3 ELISA Kit 大鼠CXC趨化因子受體3 96T |
Rab27a: RAM-11抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PTPH1/PTPN3 蛋白酪0酸酶H1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-HER2 (Tyr877)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化HER2受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CCDC43: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Bone Sialoprotein/BSP 骨涎蛋白 規(guī)格 0.1ml | Anti-CXC-R1 /FITC 熒光素標(biāo)記細胞表面趨化因子受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
角質(zhì)形成細胞生長因子受體抗體 Anti-KGFR 0.2ml | AP1M2: AP-1μ2抗體 0.1ml |
M1 小鼠白血病細胞 | CM-R002大鼠肺血管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
NCI-N87細胞,,人胃腺癌細胞 人跟骨髓瘤細胞,Hp2/o細胞 草魚腎細胞;GIK | DH82(犬巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠腦膜細胞培養(yǎng)基 100mL | IFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
SK-N-SH, 人母細胞瘤細胞 | CL-0124IMR-32(人母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
MCF 10A人正常上皮細胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052) | 兔骨骼肌成纖維原代細胞CCDC43: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞;VERO-76 | P815細胞,小鼠肥大細胞癌細胞 V79-4(中國倉鼠肺細胞) 非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C |
HBdMEC-c 人膀胱微血管內(nèi)皮細胞(HBdMEC) 500,000cells 皮下脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C | IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRIM19 干擾素/維誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體 規(guī)格 0.1ml | 人上皮細胞HMEpiC |
EMSY: EMSY蛋白抗體 0.2ml | Anti-LYVE-1 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | M1 小鼠白血病細胞 |
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。