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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔睪丸間質采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
實驗室分離的兔睪丸間質經3β-HSD免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔睪丸間質原代細胞 | 組織來源 | 睪丸 |
英文名稱 | Rabbit Testicular Mesenchymal Cells | 貨號 | YS-01X7879 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔睪丸間質細胞分離自睪丸組織,；睪丸間質細胞成群分布在曲精小管之間,，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形,，胞體較大,，直徑約20μm，胞質呈嗜酸性,，細胞核呈圓形或卵圓形,，常位于中央，染色較淡,，有1-2個核仁線粒體多,，呈管嵴狀，無分泌顆粒。從青春期開始,，睪丸間質細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質細胞刺激素（黃體生成素）的作用,，能合成分泌雄性激素，可促進的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育,，以及維持第二性征和性功能,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔睪丸間質細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
小鼠肉瘤瘤株;S180 | GMP-140 ELISA Kit 大鼠血漿α顆粒膜蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CYP11B2： 醛固酮合成酶CYP11B2抗體 0.2ml | GABRD： G基受體δ/GABAA Rδ抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CDX1 尾側型同源轉錄因子1抗體 規(guī)格 0.2ml | PI3 Kinase p110 beta： 0脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 0.1ml |
Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser896) /FITC 熒光素標記0酸化谷受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽) 0.5mg |
Rabbit Anti-dog IgM/Gold 金標記兔抗狗IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | Mfn1： 線粒體融合蛋白1抗體 0.1ml |
KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞裂解液 (陽性對照) | BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572) | 18. 卵巢細胞系統(tǒng) |
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | NA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1(KAN-1)/2004) 酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) | COC1/CDDP細胞,，人卵巢癌耐藥株 大黃魚腎細胞,PCK細胞 臍靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
HET-1A, 人食管上皮細胞 | 兔睪丸間質原代細胞PI3 Kinase p110 beta： 0脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 0.1ml |
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞 大鼠肝細胞瘤,，H-4-II-E細胞 RAW 264.7(單核巨噬細胞白血病) | 人結直腸腺癌細胞;COLO 205 |
Peng EBV-轉化人淋巴細胞 | IL10RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL10RA 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-IL-17RB/FITC 熒光素標記白介素-17B受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-SAMDC S-腺苷蛋脫羧酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CM-R043大鼠小腸平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 0酸化蛋白質酪激酶JAK-1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KIF2B 有絲分裂驅動蛋白樣2B抗體 規(guī)格 0.2ml |
ACTH ELISA Kit 魚促腎上腺皮質激素 96T | KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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