產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
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貨號(hào) | YS-01X7208 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
15201736385 |
參考價(jià) | ¥1-¥580 | /件 |
更新時(shí)間:2025-05-16 09:54:15瀏覽次數(shù):41
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
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貨號(hào) | YS-01X7208 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
細(xì)胞屬性:
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,,通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 兔肝內(nèi)膽管上皮原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 膽管組織 |
英文名稱(chēng) | Rabbit Intrahepatic Bile Duct Epithelial Cells | 貨號(hào) | YS-01X7208 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,,并在身體里面起著去氧化,、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,,在右側(cè)橫隔膜之下,,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方,。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,,又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,,肝上面則與膈及腹前壁相接,。通過(guò)控制激素調(diào)控的分泌和吸收,在保持,、調(diào)整和擴(kuò)大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用,,肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞在先天性和獲得性免疫應(yīng)答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞約占肝細(xì)胞總數(shù)的5%,,其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu),。肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞具有復(fù)雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝,、排泌,、免疫等生理過(guò)程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起一定的作用,。研究表明,,常見(jiàn)的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,,都是以肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞為病變靶位,,進(jìn)而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此,,了解正常肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的病理特征對(duì)研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機(jī)制,、診斷和治療具有重要意義。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟:
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),,PBS沖洗3次,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,,每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀(guān)察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀(guān)察。
公司產(chǎn)品:
大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;A7r5 肝癌細(xì)胞,,SMMC-7721細(xì)胞 ECA細(xì)胞,小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞 | TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 小鼠壞死因子β 96T |
Rbms3: 抑癌基因Rbms3抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh PTPIP51/FAM82A2 蛋白酪0酸酶相互作用蛋白51抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-HER2(Tyr1248) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化HER2受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CCDC46: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Borealin/CDCA8 細(xì)胞分裂周期蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-CXCL16/FITC 熒光素標(biāo)記CXC趨化因子16抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10抗體 anti-FGF-10 0.2ml | Allergin-1: 肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體 0.1ml |
DU 145, 人前列腺癌細(xì)胞 Human | CM-H110人皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細(xì)胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤) | 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(傣族);KM9405 | BC-021(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF | CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
GP2-293Luc細(xì)胞,,人胚腎上皮包裝細(xì)胞 綠猴恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞 CL-0348Hce-8693(人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))5×106cells/瓶×2 | 兔肝內(nèi)膽管上皮原代細(xì)胞CCDC46: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO | 3T3TK細(xì)胞,,小鼠成纖維細(xì)胞 TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3-VP16-TNFa細(xì)胞 人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μg |
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U937 [U-937] 大鼠外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRK1 G蛋白偶合受體激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | 人上皮細(xì)胞;MCF-10A |
E2F8: 轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體 0.2ml | Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 0酸化膜相關(guān)蛋白酪激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit 小鼠游離脂肪酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | DU 145, 人前列腺癌細(xì)胞 Human |