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兔肝內膽管上皮原代細胞

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更新時間:2025-05-16 09:54:15瀏覽次數(shù):40

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7208 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔肝內膽管上皮原代細胞公司出售的產品:小鼠原代骨髓間充質干細胞 小鼠骨髓基質細胞 英文名稱: OP9 人星形膠質細胞培養(yǎng)試劑盒 人星形膠質細胞培養(yǎng) 大鼠胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 元細胞 雞原代骨骼肌細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔肝內膽管上皮原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的兔肝內膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,,通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測

公司實驗室分離的兔肝內膽管上皮細胞 經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

產品名稱

兔肝內膽管上皮原代細胞

組織來源

膽管組織

英文名稱

Rabbit   Intrahepatic Bile Duct Epithelial Cells

貨號

YS-01X7208

產品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔肝內膽管上皮細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,,并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用,;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,,在右側橫隔膜之下,,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方,。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,,又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機體位置和形態(tài)結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,,大部分肝為肋弓所復蓋,,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,,肝上面則與膈及腹前壁相接,。通過控制激素調控的分泌和吸收,在保持,、調整和擴大膽小管的結構中發(fā)揮重要作用,,肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%,,其在肝內膽道系統(tǒng)內形成復雜的網(wǎng)狀管形結構。肝內膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能,,參與肝臟的代謝,、排泌、免疫等生理過程,,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用,。研究表明,常見的肝內膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎,、膽管癌等疾病,,都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位,,進而引起肝內膽管上皮損傷。因此,,了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發(fā)病機制,、診斷和治療具有重要意義。

兔肝內膽管上皮原代細胞

培養(yǎng)信息:

兔肝內膽管上皮原代細胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 FBS,、生長添加劑,、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO25%

兔肝內膽管上皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔肝內膽管上皮原代細胞

1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;

⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基,。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。

操作步驟:

兔肝內膽管上皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,,待細胞長至80%時取出爬片,。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細胞通透,。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,,每次3min,。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,每次3min,。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍,。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。

11. 鏡檢觀察,。

公司產品:兔肝內膽管上皮原代細胞


大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5 肝癌細胞,SMMC-7721細胞 ECA細胞,,小鼠艾氏腹水瘤細胞

TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor   Beta) ELISA KIT 小鼠壞死因子β 96T

Rbms3: 抑癌基因Rbms3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh PTPIP51/FAM82A2 蛋白酪0酸酶相互作用蛋白51抗體 規(guī)格   0.2ml

Anti-Phospho-HER2(Tyr1248) /FITC 熒光素標記0酸化HER2受體抗體IgGMulti-class   antibodies規(guī)格: 0.2ml

CCDC46: 卷曲螺旋結構域蛋白46抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Borealin/CDCA8 細胞分裂周期蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-CXCL16/FITC 熒光素標記CXC趨化因子16抗體IgGMulti-class   antibodies規(guī)格: 0.2ml

成纖維細胞生長因子-10/纖維母細胞生長因子-10抗體 anti-FGF-10 0.2ml

Allergin-1: 肥大細胞膜抑制性受體Allergin1抗體 0.1ml

DU 145, 人前列腺癌細胞 Human

CM-H110人皮膚肥大細胞培養(yǎng)基100mL

5-8F, 人高轉移鼻咽癌細胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤)

小鼠漿細胞瘤;MPC-11

EB病毒轉化的人B淋巴細胞(傣族);KM9405

BC-021(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞;HFTF

CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞)5×106cells/瓶×2

GP2-293Luc細胞,,人胚腎上皮包裝細胞   綠猴恒河猴腎細胞,LLC-MK2細胞 CL-0348Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))5×106cells/瓶×2

兔肝內膽管上皮原代細胞CCDC46: 卷曲螺旋結構域蛋白46抗體 0.2ml

非洲綠猴腎細胞;VERO

3T3TK細胞,小鼠成纖維細胞   TNFa轉染耐VP16絨癌細胞,JEG-3-VP16-TNFa細胞   人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg

人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937] 大鼠外周血白細胞培養(yǎng)基 100mL

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞) 5×106cells/瓶×2

大鼠視網(wǎng)膜微血管內皮細胞培養(yǎng)基 100mL

IgG/APC APC標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml

Rhesus antibody Rh GRK1 G蛋白偶合受體激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

人上皮細胞;MCF-10A

E2F8: 轉錄因子E2F8抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 0酸化膜相關蛋白酪激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit   小鼠游離脂肪酸Multi-class antibodies規(guī)格:   48T

DU 145, 人前列腺癌細胞 Human

 

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