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詳細介紹
兔肝非實質原代細胞
兔肝非實質細胞分離自肝臟組織,；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖,、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁,。肝臟是機體內臟里大的器官,，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面,，大部分肝為肋弓所復蓋,，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接,。肝實質細胞具有肝功能的單位,，是肝臟的基本組成單位之一。肝非實質細胞是指除了肝實質細胞之外的細胞,，主要包含了肝竇內皮細胞,、肝星狀細胞、肝枯否細胞,。
英文名稱 | Rabbit Hepatic Nonparenchymal Cells | 組織來源 | 肝 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X8350 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：兔肝非實質細胞
組織來源：肝
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不增殖,；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔肝非實質細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔肝非實質采用取肝臟灌流、膠原酶消化,、密度梯度離心法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔肝非實質經過檢測,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
7WML6.0細胞,，人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株 生孢梭菌 狗肺成纖維樣細胞;DogL1 | Rhesus antibody Rh GDIA1 轉移抑制基因GDIA1抗體 規(guī)格 0.1ml |
SP-A(Human Pulmonary surfatcant-associated protein A) ELISA Kit 人肺表面活性物質相關蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/PE PE標記的小鼠抗IgG 0.1ml |
IL-8： 白介素8抗體 0.1ml | ANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗元核抗體1型/抗Hu抗體 96T |
Rhesus antibody Rh RERE 肌相關蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-LDL-R/FITC 熒光素標記低密度脂蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin(Ser38) 0酸化原癌基因蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml | MUC5AC(Mouse Mucin-5 subtype AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC 96T |
PPBP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽) | EJ 人膀胱癌細胞 |
SW1116人結腸腺癌細胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽) |
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293 | 人胚胎,，皮膚，肌肉;M-22 |
人食管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 人食道平滑肌細胞裂解物HESMCL |
豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4 中國倉鼠體細胞,，R 1610細胞 IAR20細胞,，大鼠肝細胞 | 兔肝非實質原代細胞ANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗元核抗體1型/抗Hu抗體 96T |
人肺動脈成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H095人骨骼肌細胞培養(yǎng)基100mL |
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) | Rhesus antibody Rh APC6/CDC16 細胞分裂周期蛋白16抗體 規(guī)格 0.2ml |
phospho-BCAR1(Tyr165)： 0酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 0.1ml | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7 |
Anti-Slug/FITC 熒光素標記鋅指轉錄因子Slug抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PBOV1： 前列腺癌和癌高表達蛋白抗體 0.2ml |
Anti-CDK3 /FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PPBP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數,。
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