詳細(xì)介紹
兔腹腔巨噬原代細(xì)胞
兔腹腔巨噬細(xì)胞分離自腹腔,;腹腔,,即軀干腹部的腔,內(nèi)襯腹膜,,由體壁,、橫膈膜和盆底圍成,其內(nèi)容納胃,、肝,、膽囊、脾臟,、胰,、腎臟、腸,、闌尾,、膀胱、泌尿系和婦科(子宮,、附件)等其他內(nèi)臟器官,。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,,是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,,便于培養(yǎng),,并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,,在條件適宜下可生活2-3周,,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,,源自單核細(xì)胞,,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫),。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,,令其對病原體作出反應(yīng),。巨噬細(xì)胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一;腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬,、免疫和分泌作用都十分活躍,,有重要防御功能。
英文名稱 | Rabbit Peritoneal Macrophage Cells | 組織來源 | 腹腔液 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7058 |
細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔腹腔巨噬細(xì)胞
組織來源:腹腔液
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 (12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔腹腔巨噬采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔腹腔巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7 小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B 96T |
RELM alpha: 抵抗素樣分子α抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PTPN11 蛋白酪0酸酶2抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Phospho-HER2(Tyr1112) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化HER2受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CCDC63: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BORIS/CT27 /抗原27抗體(高遷移率族蛋白) 規(guī)格 0.2ml | Anti-CXCL15/Lungkine/FITC 熒光素標(biāo)記趨化因子CXCL15體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
成纖維細(xì)胞生長因子-8/纖維母細(xì)胞生長因子-8抗體 Anti-FGF-8/HBGF-8 0.1ml | ACCN1: 腦通道蛋白1抗體 0.2ml |
人腦血管平滑肌細(xì)胞 Human | ACTE1 非洲爪蟾胚胎細(xì)胞 |
CL-0206SGC7901(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 |
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T | 人胚胎,,皮膚,,肌肉;M-7 |
CM-M003小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | CL-0120HuH-7(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3 中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL/IU[CHL-11]細(xì)胞 C3H 10T1/2 2A6細(xì)胞,,小鼠成纖維細(xì)胞 | 兔腹腔巨噬原代細(xì)胞CCDC63: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO | rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞 A4細(xì)胞 HL-7702(肝細(xì)胞) |
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S |
大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRK2/BARK1/ADRBK1 G蛋白偶合受體激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml | 人上皮細(xì)胞;Ca Ski |
ER81: 轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體 0.2ml | Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 0酸化膜相關(guān)蛋白酪激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse platelet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaMulti-class antibodies規(guī)格: 48T | 人腦血管平滑肌細(xì)胞 Human |