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兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-16 09:39:48瀏覽次數(shù):43

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8341 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代肺血管平滑肌細(xì)胞 猴胚胎上皮細(xì)胞 英文名稱: Marc145 人平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人平滑肌細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 微血管內(nèi)皮細(xì)胞 人原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

兔肺微血管平滑肌細(xì)胞分離自肺組織,;肺是機(jī)體的呼吸器官,,位于胸腔,,左右各一,,覆蓋于心之上,。肺有分葉,,左二右三,共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等)與喉、鼻相連,,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。肺血管平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞,。肺血管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓,;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞,。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素,,新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān),。

英文名稱

Rabbit Pulmonary   Microvascular Smooth Muscle Cells

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號

YS-01X8341

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:兔肺微血管平滑肌細(xì)胞

組織來源:

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%CO2,,5%

兔肺微血管平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

方法簡介

實驗室分離的兔肺微血管平滑肌采用混合膠原酶消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔肺微血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;

②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;

③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte

NIS: 轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體   0.2ml

Rhesus antibody Rh MBNL3 毒蕈堿樣蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-TSHR(NT)/FITC 熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體(N)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

SRF(Serum response factor) 血清應(yīng)答因子抗原 0.5mg

Anti-P16 抑癌基因p16抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Anti-GAPDH/FITC 熒光素標(biāo)記3-0酸甘油醛脫氫酶IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh SLC14A1/RACH1 尿素轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白抗體   規(guī)格 0.2ml

Anti-Phospho-FAK (Tyr925) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠0酸化粘著斑激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-ATF6/FITC 熒光素標(biāo)記活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

TNFRSF9 Others Canine CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA

PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MDA-MB-436(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2   L929(成纖維細(xì)胞)

TEK Others Cynomolgus 食蟹猴 Tie2 / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

IgG3 Others Mouse 小鼠 IgG3-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

II型肺泡上皮細(xì)胞Many   types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞Anti-P16 抑癌基因p16抗體Multi-class   antibodies規(guī)格: 0.1ml

ITK Others Mouse 小鼠 ITK Kinase (aa 351-619) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白 (His 標(biāo)簽)

氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

LCN2 Others Human LCN2 / NGAL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

狗腎細(xì)胞;Super Tube 胚胎成纖維細(xì)胞,,3T6-Swiss albino細(xì)胞 Hed68細(xì)胞,,果子貍腎上皮細(xì)胞

GIMAP7 GTPIMAP家族成員7抗體 0.2ml

Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓調(diào)節(jié)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

纖毛蛋白-2抗體   Anti-NRP-2 0.1ml

E3 ELISA Kit 大鼠雌三醇 96T

phospho-ATM(Ser1981) 0酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 0.1ml

TNFRSF9 Others Canine CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

 

兔肺微血管平滑肌原代細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;

1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。


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