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詳細介紹
兔肺微血管內(nèi)皮原代細胞
兔肺微血管內(nèi)皮細胞分離自肺組織,；肺是機體的呼吸器官,，位于胸腔，左右各一,，覆蓋于心之上,。肺有分葉，左二右三,，共五葉,。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉,、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅,。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生,、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形,，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列,。肺微血管內(nèi)皮細胞構成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換,，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義,。
英文名稱 | Rabbit Pulmonary Microvascular Endothelial Cells | 組織來源 | 肺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7027 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔肺微血管內(nèi)皮細胞
組織來源：肺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔肺微血管內(nèi)皮采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔肺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
人導管瘤細胞;UACC812 大鼠腎系膜細胞培養(yǎng)基 100mL | Rhesus antibody Rh GDN/SERPINE2 膠質(zhì)源性連接蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
LRP(Human Lung resistance-related protein) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗IgG 0.1ml |
Integrin alpha E： 整合素αE抗體Integrin αE 0.1ml | ET-1(Mouse Endothelin 1)ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮素1 96T |
Rhesus antibody Rh Resistin 抵抗素抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-LDH/FITC 熒光素標記抗乳酸脫氫酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-Syk (Tyr323) 0酸化非受體型酪蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml | BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein)ELISA Kit 兔骨鈣素 ELISA試劑盒 96T |
Lewis 小鼠肺癌細胞 | HEPG2.2.15 肝癌細胞HBV病毒株 |
CL-0290MDA-MB-468(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 | RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞 |
大鼠腦動脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | IFNA7 Protein Human 重組人 Ierferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標簽) |
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系 | 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
RF/6A猴脈絡膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 兔肺微血管內(nèi)皮原代細胞ET-1(Mouse Endothelin 1)ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮素1 96T |
CL-0193RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H092人脈絡膜血管細胞培養(yǎng)基100mL |
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] | Rhesus antibody Rh APE/Girdin 肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-BCAR1 (Tyr751)： 0酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 0.1ml | 大鼠腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
Anti-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC 熒光素標記抗豬水腫素(O139)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PRODH： 脯酸脫氫酶抗體 0.2ml |
Anti-CDK1/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Lewis 小鼠肺癌細胞 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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