化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
兔肺大動脈內(nèi)皮原代細胞
兔肺大動脈內(nèi)皮細胞分離自肺大動脈組織；肺大動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中,，把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,，經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),，為一粗短的動脈干,。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行,，至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈。左肺動脈較短,，在左主支氣管前方橫行,，分二支進入左肺上、下葉,。右肺動脈較長而粗,，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進入右肺上,、中,、下葉。細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,；該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì),、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用,。肺大動脈內(nèi)皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,，該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì),、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用,。
英文名稱 | Rabbit Pulmonary Great Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 肺動脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8339 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔肺大動脈內(nèi)皮細胞
組織來源：肺動脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔肺大動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔肺大動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔肺大動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠癌細胞;CCC-Ca761-03 小鼠外周血白細胞培養(yǎng)基 100mL | ADAM15： 去整合素樣金屬蛋白酶15抗體 0.1ml |
Anti-H-ras/Ras/Ras p21 原癌基因H-ras抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh A2BP1/Fox1 共濟失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-CCK8/FITC 熒光素標記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IAA 吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml |
IGF-1 R 人胰島素樣生長因子-I受體 0.5mg | HDAC1： 組蛋白去乙?；?span>1抗體 0.2ml |
IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的驢抗羊IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FADD Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 規(guī)格 0.1ml |
人少突膠質(zhì)細胞 Human | 人髂動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
L929細胞，小鼠成纖維細胞 3T3-L1(小鼠脂肪細胞) 小鼠腦瘤細胞;BC3H1 | CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽) |
人臍帶單核細胞培養(yǎng)基 100mL | CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 |
CM-R112大鼠小腦顆粒細胞培養(yǎng)基100mL | Caki-2(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
7WCY1.0細胞,，人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株 非01群 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4 | 兔肺大動脈內(nèi)皮原代細胞Rhesus antibody Rh IAA 吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml |
A172(人腦膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | CAT Others Human 人 CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
LTEP-sm細胞,，人小細胞肺癌細胞 小鼠皮膚細胞,JB6-C41細胞 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2 | 人腸微血管內(nèi)皮細胞HIMEC |
MTT細胞活力和增殖檢測試劑盒MTT | Rhesus antibody Rh IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml |
TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1 96T | 大鼠肝細胞;BRL 3A |
Recomb Protein G/FITC 熒光素(FITC)標記重組蛋白-GMulti-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | FT4(Human Free Thyroxine) ELISA Kit 人游離甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MPP4： MPP4蛋白抗體 0.2ml | 人少突膠質(zhì)細胞 Human |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
化工儀器網(wǎng)