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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的兔肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的兔肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 兔肺成纖維原代細胞 | 組織來源 | 肺組織 |
英文名稱 | Rabbit Lung Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X7038 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔肺成纖維細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官,，位于胸腔,，左右各一，覆蓋于心之上,。肺有分葉,，左二右三，共五葉,。肺經(jīng)肺系（指氣管,、支氣管等）與喉、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶,，鼻為肺之外竅。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質細胞分化而來,；成纖維細胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團,；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大,，細胞質透明，細胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持肺器官的正常形態(tài),，合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit 人0酯酶C 96T | Anti-MMP-17/FITC 熒光素標記基質金屬蛋白酶-17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thy-1/CD90/ Thy1.1 CD90抗體 規(guī)格 0.1ml | Human Nephrin ELISA Kit 人蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HOXA6： 同源盒基因HOXA6蛋白抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathepsin C 組織蛋白酶C抗體 規(guī)格 0.1ml |
FPGT： 巖藻糖10酸鳥苷酰轉移酶抗體 0.2ml | CT ELISA Kit 大鼠降鈣素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
人胚胎絨毛細胞(HAF)(1×106 ) | BC-021(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP |
人間充質干細胞-肝臟總RNAHMSC-hp NA | B3G2 Others Human 人 B3G2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL13 Others Mouse 小鼠 IL13 / ALRH 人細胞裂解液 (陽性對照) |
PRMT5 Others Human 人 PRMT5 人細胞裂解液 (陽性對照) | HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人腦膜細胞cDNAHMC cDNA |
KM小鼠腦膠質母細胞瘤瘤株;G422 | 兔肺成纖維原代細胞Human Nephrin ELISA Kit 人蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細胞裂解液 (陽性對照) | 豚鼠心肌細胞;GP-H1 |
TE-1(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | HS68細胞，人男性正常細胞系 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞,RBL-1細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM |
CD2 Others Canine 狗 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Rad17/FITC 熒光素標記細胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Ovalbumin： 雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體 0.1ml | MICB Others Human 人 MICB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SOX11： 轉錄因子SOX-11蛋白抗體 0.2ml | C9orf75： 9號染色體開放閱讀框75抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy3 Cy3標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | 人胚胎絨毛細胞(HAF)(1×106 ) |
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