詳細介紹
兔腸系膜上動脈內(nèi)皮原代細胞
兔腸系膜上動脈內(nèi)皮細胞分離自腸系膜動脈組織,;腸道指的是從胃幽門至門的消化管,。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,,大腸主要濃縮食物殘渣,,形成糞便,再通過直腸經(jīng)門排出體外,。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng),。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi),,分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈,。前者主要分布于小腸左側(cè),后者分布于結(jié)腸,、大腸,、泄殖腔等處。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞,,由一層扁平細胞所組成,。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口,。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),,由心臟直至小的微血管。
英文名稱 | Rabbit Superior Mesenteric Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 腸系膜 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8334 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔腸系膜上動脈內(nèi)皮細胞
組織來源:腸系膜
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件:PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔腸系膜上動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔腸系膜上動脈內(nèi)皮采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腸系膜上動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
小鼠紋狀體元MN-s | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪酸激酶2 96T | Anti-MMP-16/FITC 熒光素標記基質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thymidylate synthase/TS 胸苷酸合成酶抗體 規(guī)格 0.1ml | Human podocin ELISA Kit 人PodocinMulti-class antibodies規(guī)格: 48T |
HOXA7: 同源盒基因HOXA7蛋白抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathepsin D/CTSD 組織蛋白酶D抗體 規(guī)格 0.1ml |
FREM1: 細胞外基質(zhì)蛋白FREM1抗體 0.2ml | VLA ELISA Kit 大鼠遲現(xiàn)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) | PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人間充質(zhì)干細胞-臍帶 | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/3/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL1R2 Others Canine 狗 IL1R2 / IL1RB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人細胞裂解液 (陽性對照) | COCH Others Human 人 COCH / Cochlin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
KM小鼠子瘤株;U27 | 兔腸系膜上動脈內(nèi)皮原代細胞Human podocin ELISA Kit 人PodocinMulti-class antibodies規(guī)格: 48T |
TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 人細胞裂解液 (陽性對照) | 293 人胚腎細胞 |
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C 人膀胱癌細胞,5637細胞 BEL-7402(肝癌細胞) |
ABHD4 Others Human 人 ABHD4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Raptor /FITC 熒光素標記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Orexin receptor 1+2: 丘腦分泌素受體1+2/食欲素受體1+2抗體 0.1ml | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1008 人少突起前質(zhì)膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基 100mL |
SOX14: 核轉(zhuǎn)錄因子SOX14抗體 0.2ml | CD4: CD4抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy5 Cy5標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) |