詳細(xì)介紹
兔腸成纖維原代細(xì)胞
兔腸成纖維細(xì)胞分離自腸道組織,;腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,,再通過直腸經(jīng)門排出體外,。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,,以提供足夠的養(yǎng)分,,其實它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。各種哺乳動物腸的結(jié)構(gòu)和功能基本相似,。腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層,,由外向內(nèi)依次為:漿膜層(腹腔臟層),平滑肌層,,黏膜下層和黏膜層,。平滑肌層的外層為縱行肌纖維,內(nèi)層為環(huán)形肌纖維,,兩者都以螺旋式走行,,它們以收縮和舒張來完成腸的機(jī)械性消化,。黏膜層又分為3層:靠近黏膜下層的是一層平滑肌,稱為黏膜肌層,。其次為結(jié)締組織,,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的黏膜,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。
英文名稱 | Rabbit Intestinal Fibroblast Cells | 組織來源 | 腸 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8324 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔腸成纖維細(xì)胞
組織來源:腸
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%
兔腸成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔腸成纖維采用膠原酶-酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
NCI-H446細(xì)胞,人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞 CM-H111人成骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | ADORA1: 腺苷A1受體抗體 0.1ml |
Anti-HPV16 E6 + HPV18 E6 人類狀瘤病毒16/18 E6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh AAK1 AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-CBX5/FITC 熒光素標(biāo)記CBX5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh IBRDC2/RNFB E3泛素蛋白連接酶B抗體(環(huán)指蛋白B) 規(guī)格 0.2ml |
APC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原 0.5mg | Phospho-HP1(Tyr43): 異染色質(zhì)蛋白10酸化抗體(果蠅) 1ml |
IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAHD2A 延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | BEAS-2B 人支氣管上皮細(xì)胞 |
CL-0166NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 |
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17 | ECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2 | LIF Protein Mouse 重組小鼠 LIF 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
ACHN細(xì)胞,,人腎癌細(xì)胞系 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,W6/32細(xì)胞 CL-0438SF767(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 兔腸成纖維原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh IBRDC2/RNFB E3泛素蛋白連接酶B抗體(環(huán)指蛋白B) 規(guī)格 0.2ml |
P815 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞 | PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
OKT 11雜交瘤細(xì)胞抗CD2 OKT 11 hybridoma cells against CD2 IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS | 小鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
MN-h, 小鼠海馬元 | Rhesus antibody Rh IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.3ml |
TIMP-4(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4 96T | MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
ART(Artemin)(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg | 17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羥孕酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
MAGP2: 纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體 0.1ml | P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |