詳細介紹
兔表皮角化上皮原代細胞
兔表皮角化細胞分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,,由胚胎時期外胚層形成,,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),,由復層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層,、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細胞(KC)是構(gòu)成表皮的主要細胞成分,,在體內(nèi)處于不斷增殖過程中,,分裂的角化細胞主要位于其基底層,少數(shù)位于棘細胞層,。隨著向表層的推移,,細胞的分化程度逐漸增加,并喪失分裂活性,。
英文名稱 | Rabbit Epidermal keratinized epithelial Cells | 組織來源 | 皮膚 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8321 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔表皮角化上皮細胞
組織來源:皮膚
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-3代左右,;2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔表皮角化上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的兔表皮角化上皮細胞先蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔表皮角化上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠星形膠質(zhì)細胞MA | Nm23-H2: 抑制基因抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MCG10 RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-tsg101/FITC 熒光素標記tsg101抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
SSTR2 (somatostatin receptor 2) 受體2抗原 0.5mg | Anti-oxytocin receptor 催產(chǎn)素受體(受體)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
Anti-Galectin-3/FITC 熒光素標記半乳糖凝集素-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC25A10 線粒體二羧酸載體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-phospho-JNK1/2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標記抗0酸化氨基末端激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 熒光素標記兔抗人,、大、小鼠0酸化ATR抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) | Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角質(zhì)細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml |
人角膜細胞HK | IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H157(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細胞) | EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928 人前脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL | CD276 Others Rat 大鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MesenFectagen? 間充質(zhì)干細胞轉(zhuǎn)染試劑盒 | 兔表皮角化上皮原代細胞Anti-oxytocin receptor 催產(chǎn)素受體(受體)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細胞裂解液 (陽性對照) | EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 |
臍帶單核細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 人系統(tǒng)周邊細胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海馬膠質(zhì)細胞(EGFP標記) Mouse |
CRFK貓腎細胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | GIMAP6: GTP酶IMAP家族成員6抗體 0.2ml |
Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 球蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 48T | SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
細胞毒性受體NK-p44抗體 Anti-CD336/NKp44/NCR2 0.1ml | HEV-IgG(Human hepatitis E virus IgG) ELISA Kit 人戊型肝炎病毒IgG 96T |
ASF1A: 細胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體 0.1ml | TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。