詳細(xì)介紹
兔表皮黑色素原代細(xì)胞
兔表皮黑色素細(xì)胞分離自皮膚組織,;表皮位于動物皮膚的外層,,由胚胎時期外胚層形成,,具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,,即基底層,、棘層、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層,。黑色素細(xì)胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細(xì)胞,起源于嵴,,后逐漸遷移到表皮和毛囊,。黑色素細(xì)胞的異常或功能的失常導(dǎo)致了一系列難治性色素性疾病的發(fā)生,,如,、黃褐斑等。表皮黑色素細(xì)胞主要分布于位于表皮的基底層,,與表皮細(xì)胞共同組成表皮黑素單位,,其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護皮膚免受損害。
英文名稱 | Rabbit Epidermal Melanocyte Cells | 組織來源 | 皮膚 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8320 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形,、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔表皮黑色素細(xì)胞
組織來源:皮膚
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔表皮黑色素細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔表皮黑色素細(xì)胞先蛋白酶消化,、后-膠原酶混合消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔表皮黑色素經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
CM-R083大鼠滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | Rhesus antibody Rh GDPD5 甘油0酸二酯酶0酸結(jié)構(gòu)域5抗體 規(guī)格 0.2ml |
SP-C(Human Pulmonary surfatcant-associated protein C) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CMulti-class antibodies規(guī)格: 48T | IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml |
Phospho-IRAK1 (Thr209): 0酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 0.1ml | PAI-1 ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1 96T |
Rhesus antibody Rh Rex1/Zinc finger protein 754 鋅指蛋白754抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC 熒光素標(biāo)記核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-SYN1(Ser62+Ser67) 0酸化突觸素1抗體 規(guī)格 0.1ml | ANG- II (Mouse angiotension II ) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅱ 96T |
NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞 | 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP |
HL-7702細(xì)胞,人肝細(xì)胞正常 人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株,AMS2細(xì)胞 敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1 | LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
HEH 人胚胎心臟組織來源細(xì)胞 | 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素裂解物HELM-d L |
MKN-45人胃癌細(xì)胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBS | 兔表皮黑色素原代細(xì)胞PAI-1 ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1 96T |
HOS 骨肉瘤 | U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL4 |
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-H081人主動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
白細(xì)胞介素-1超家族 | Rhesus antibody Rh Apg12 自噬相關(guān)蛋白12抗體 規(guī)格 0.2ml |
BANF1: 障礙自整合蛋白BAF抗體 0.2ml | SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7 |
Anti-VIP/FITC 熒光素標(biāo)記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | PNPLA6: 含patatin樣0脂酶6抗體 0.1ml |
Anti-Phospho-cdc25A ( Ser178) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠0酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞 |