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詳細(xì)介紹
人子宮內(nèi)膜干原代細(xì)胞
人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官,，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,，由上皮（屬單層柱狀上皮,，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成,，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚,，約占內(nèi)膜厚度的4/5,；基底層較薄較致密，約占1/5,，功能層可剝脫,，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層,，位于子宮腔面,，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來源于胚胎時期的中胚層組織,，具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,，具有向脂肪細(xì)胞,、成骨細(xì)胞,、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力，運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,，目前已能夠從骨髓,、脂肪、滑膜,、骨骼,、肌肉等組織以及羊水、臍帶,、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Human Endometrial Stem Cells | 組織來源 | 子宮組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7666 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞
組織來源：子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜干采用膠原酶消化法,、低密度稀釋克隆制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2 | Nogo R： 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MCK10/CD167a/DDR1 上皮酪激酶抗體(癌激酶10) 規(guī)格 0.1ml | Anti-TSARG7/FITC 熒光素標(biāo)記發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
SSTR5 (somatostatin receptor 5) 受體5抗原 0.5mg | Anti-Osterix 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-Galectin /FITC 熒光素標(biāo)記半乳糖凝集素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC25A13 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬/谷載體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-PHD3 /FITC 熒光素標(biāo)記羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-AT2R/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞總RNAHCSMC NA | PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
hCD34+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD34+祖細(xì)胞(hCD34+-CB),，單一來源 100000 人卵巢成纖維細(xì)胞HOF | LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Neuro-2a/N2a(小鼠腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | ACY1 Others Human 人 ACY1 / Aminoacylase-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
MN-h, 小鼠海馬元 | 人子宮內(nèi)膜干原代細(xì)胞Anti-Osterix 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人少突膠質(zhì)細(xì)胞 |
破骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | GFRA1 Others Human 人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
J-1111細(xì)胞，白血病單核細(xì)胞 人肺支氣管癌細(xì)胞,NCI-H1650細(xì)胞 CL-0436SF17(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | GTPBP9： 核苷酸結(jié)合蛋白9抗體 0.2ml |
Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 人白血病抑制因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | ACVR1B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
細(xì)胞毒性受體NK-p46抗體 Anti-CD335/NKp46/NCR1 0.1ml | T4 ELISA Kit 大鼠甲狀腺素 96T |
ASGPR1： 唾液酸糖蛋白受體1抗體 0.1ml | IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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