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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人子宮成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的人子宮成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產品名稱 | 人子宮成纖維原代細胞 | 組織來源 | 子宮組織 |
英文名稱 | Human Uterine Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X7213 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人子宮成纖維細胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官,，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間,，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持，這些結構受損或松弛時,，可以引起子宮脫垂,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來,；成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的子宮成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合，并彼此連接成網狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。子宮成纖維細胞的主要特征：①是子宮的重要細胞組成，在體外易于培養(yǎng),；②在子宮損傷后能修復和重塑子宮,；③在子宮炎癥時能有效控制炎癥擴散,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產品：
mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 小鼠雜交瘤細胞，7F2細胞 EL4. IL-2(淋巴瘤細胞) | ANGPTL5： 血管生成素相關蛋白5 0.2ml |
Anti-HPV 人類狀瘤病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠0酸化原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體 規(guī)格 0.1ml |
APG4B/AUTL1 APG4B細胞自噬相關抗原 0.5mg | HSP47： 熱休克蛋白-47抗體 0.1ml |
IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗小鼠IgG 0.3ml | Rhesus antibody Rh FAIM3 FAS凋亡抑制分子3抗體 規(guī)格 0.2ml |
人結直腸腺癌細胞;HCT-8 [HRT-18] | 293 人胚腎細胞 |
CL-0281HELF(人胚肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 | rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞 |
人肺間充質干細胞RNAHPMSC miRNA5 μg | 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 |
原代系膜細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | 兔腎細胞;RK-13 |
A673細胞，橫紋肌瘤細胞 人非小細胞肺癌細胞,NCI-H838細胞 CL-0460U14-GFP(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2 | 人子宮成纖維原代細胞Rhesus antibody Rh ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體 規(guī)格 0.1ml |
FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽) | NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild | 人外根鞘細胞HHORSC |
MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 | Rhesus antibody Rh sIgA/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml |
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠 96T | CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 |
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | F-TESTO(Human Free Testoterone) ELISA Kit 人游離睪酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MrpL12： 線粒體核糖體蛋白L12抗體 0.1ml | 人結直腸腺癌細胞;HCT-8 [HRT-18] |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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