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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化,、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胰腺癌組織源經(jīng)檢測,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 人胰腺癌組織源原代細(xì)胞 | 組織來源 | 胰腺癌組織 |
英文名稱 | Human Pancreatic Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號 | YS-01X7473 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
人胰腺癌組織源細(xì)胞分離自患有胰腺癌病人的胰腺癌組織；胰腺癌是一種惡性程度很高,，診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤,，約90%為起源于腺管上皮的導(dǎo)管腺癌。其發(fā)病率和死亡率近年來明顯上升,。5年生存率<1%,，是預(yù)后差的惡性腫瘤之一。胰腺癌早期的確診率不高,，手術(shù)死亡率較高,，而很低。胰腺癌的病因尚不十分清楚,。其發(fā)生與吸煙,、飲酒、高脂肪和高蛋白飲食,、過量飲用咖啡,、環(huán)境污染及遺傳因素有關(guān)；近年來的調(diào)查報(bào)告發(fā)現(xiàn)糖尿病人群中胰腺癌的發(fā)病率明顯高于普通人群,；也有人注意到慢性胰腺炎病人與胰腺癌的發(fā)病存在一定關(guān)系,，發(fā)現(xiàn)慢性胰腺炎病人發(fā)生胰腺癌的比例明顯增高,；另外還有許多因素與此病的發(fā)生有一定關(guān)系，如職業(yè),、環(huán)境,、地理等。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,，大部分癌癥的生存率都在提高,，例如乳腺癌，結(jié)直腸癌等腫瘤,，近幾十年來,，生存率得到了大幅度的提升,。但胰腺癌的生存率一直停滯不前,，缺乏有效的治療方法，的死亡率使其成為“癌中",，體外培養(yǎng)胰腺癌組織源細(xì)胞對研究胰腺癌的治療具有重要意義,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
RN-c, 大鼠皮質(zhì)元 Y567[VTT C-79094]細(xì)胞 B95-8(EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞) | ALS2CR3： 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml |
Anti-HOXA10 HOXA10抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh AATK AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 規(guī)格 0.1ml |
Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原) 0.5mg | HHV8 ORF K2： 人類皰疹病毒8抗體/皰疹病毒8型 0.1ml |
IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM102B FAM102B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi | rEPC,，大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 |
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]細(xì)胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮細(xì)胞) | 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77 |
大鼠嗅鞘細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系 | 兔腎細(xì)胞;RK13 |
DH82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 人胰腺癌組織源原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 規(guī)格 0.1ml |
P388 小鼠白血病細(xì)胞 | CCL6 Others Mouse 小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Jurk. Clone E6-1細(xì)胞,，白血病細(xì)胞 急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,TALL-104細(xì)胞 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1 | 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素HEM-d |
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 | Rhesus antibody Rh sIgA/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml |
histon-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b 96T | EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8 |
CK19 細(xì)胞角蛋白19抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | Human Cortisol ELISA Kit 人Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Matrin 3： 核基質(zhì)蛋白3抗體 0.1ml | 人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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