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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人牙周膜干采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的人牙周膜干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人牙周膜干原代細胞 | 組織來源 | 牙周膜組織 |
英文名稱 | Human Periodontal Ligament Stem Cells | 貨號 | YS-01X7677 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人牙周膜干細胞分離自牙周膜組織,；牙周膜（牙周韌帶,、牙周間隙）是由致密結締組織所構成。多數(shù)纖維排列成束,，纖維的一端埋于牙骨質內(nèi),，另一端則埋于牙槽窩骨壁里，使牙齒固位于牙槽窩內(nèi),；牙周膜內(nèi)有,、血管、淋巴和上皮細胞等,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。間充質干細胞（mesenchymal stem cells,，MSCs）來源于胚胎時期的中胚層組織,，具有很強的自我復制和多向分化潛能，具有向脂肪細胞,、成骨細胞,、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,，運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景,，目前已能夠從骨髓、脂肪,、滑膜,、骨骼、肌肉等組織以及羊水,、臍帶,、臍帶血中分離和制備間充質干細胞,。牙周膜干細胞參與了牙周組織的病變、修復及再生過程?，F(xiàn)在,，利用牙周膜干細胞建立體外模型，已經(jīng)成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
小鼠子細胞;U14 | ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf159： 1號染色體開放閱讀框159抗體 0.2ml | GPRC5D： G蛋白偶聯(lián)受體C5家族亞型D抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CECR5 貓眼綜合征染色體候選基因5抗體 規(guī)格 0.2ml | PIWIL3： piwi樣3蛋白抗體 0.1ml |
Anti-Nox-4/NADH /FITC 熒光素標記NADPH氧化酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原 0.5mg |
IgM/Gold 金標記小鼠抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MMP-14： 基質金屬蛋白酶-14抗體 0.1ml |
IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) | PC-3(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480] | 19. 干細胞系統(tǒng) |
人張氏肝細胞;Chang liver 人上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) | H322人非小細胞肺癌細胞 H322 cells in human non small cell lung cancer DMEM+10% FBS |
Saos-2,，人成骨肉瘤細胞 | 人牙周膜干原代細胞PIWIL3： piwi樣3蛋白抗體 0.1ml |
人膀胱癌細胞;5637(HTB-9) 大鼠元細胞培養(yǎng)基 100mL | 人角膜上皮細胞RNAHCEpiC miRNA5 μg |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0906 | FGF18 Others Human 人 FGF18 / FGF-18 人細胞裂解液 (陽性對照) |
hMo-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的人類單核細胞，單一來源,，預選型 10 million 人絨毛間充質成纖維細胞HVMF | Anti-IL-13/FITC 熒光素標記白介素13抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RSK2 (Tyr529) 0酸化核糖體S6激酶RSK2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | MCG803細胞,，人胃腺癌細胞 人腦膠質瘤細胞系,U373細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO-76 |
Rhesus antibody Rh Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1361) 0酸化胰島素受體β抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLC1/KNS2 驅動蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml |
Mouse Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type I collagen, I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T | IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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