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詳細(xì)介紹
人外周血單個核原代細(xì)胞
人外周血單個核細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。外周血單個核細(xì)胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞,。目前,，主要的分離方法是密度梯度離心法，因為血液中各有形成分的比重存在差異,，因此得以分離出不同的細(xì)胞,。
英文名稱 | Human Peripheral Blood Mononuclear Cells | 組織來源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7487 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人外周血單個核細(xì)胞
組織來源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人外周血單個核采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人外周血單個核經(jīng)過檢測,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE | AT ELISA Kit 大鼠抗酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf124： 1號染色體開放閱讀框124抗體 0.2ml | Glutamate receptor 3： 谷酸受體3抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CEE 跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體 規(guī)格 0.2ml | PRMT5： 組蛋白精酸甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體 0.2ml |
Anti-Phospho-eNOS (Thr495)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化合成酶3抗體(內(nèi)皮型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原 0.5mg |
Goat Anti-Guinea IgG/Gold 金標(biāo)記羊抗豚鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | MOG： 髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體 0.1ml |
FUCA1 Others Human 人 FUCA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人胚肺二倍體細(xì)胞;HL 人小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7 | LAG3 Others Rat 大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0908 人破骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | HO-8910細(xì)胞,，人卵巢癌細(xì)胞 小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細(xì)胞,SVEC4-10細(xì)胞 腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1 | 人外周血單個核原代細(xì)胞PRMT5： 組蛋白精酸甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體 0.2ml |
小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3] 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶 |
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3 | TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Anti-IL-11/FITC 熒光素標(biāo)記白介素11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
anti-Rb/P105 RB 成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | JAR細(xì)胞，胎盤絨毛癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE30細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;pDSr a2-mpl-X |
Rhesus antibody Rh phospho-GSK-3 Beta(Ser21) 0酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 GSK3α(Phospho-Ser21) 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLF6/PAC1 轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體 規(guī)格 0.1ml |
AMPK ELISA Kit 魚0酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T | FUCA1 Others Human 人 FUCA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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