化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織,；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,，兩層間在病理情況下可分開(kāi)，稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞,、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層,、視錐、視桿細(xì)胞層,、外界膜,、外顆粒層、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層、節(jié)細(xì)胞層,、纖維層,、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,，有感光作用,；后部鼻側(cè)有一視乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)元組成,。第一元是視細(xì)胞層,，專(zhuān)司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞,。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,，而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,，專(zhuān)管傳導(dǎo),。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的纖維跨越視網(wǎng)膜表面,，經(jīng)由視到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū),，其分辨能力強(qiáng),。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力,、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用，在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義,。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有不同的特性,，在腦和視網(wǎng)膜中，這些內(nèi)皮細(xì)胞具有內(nèi)屏障的功能,，在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),，釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,，體外分離培養(yǎng)RCEC對(duì)研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機(jī)制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義,。
英文名稱(chēng) | Human Retinal Microvascular Endothelial Cells | 組織來(lái)源 | 視網(wǎng)膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7412 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源：視網(wǎng)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
敘利亞倉(cāng)鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1 | PEDF ELISA Kit 大鼠色素上皮衍生因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf127： 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框127抗體 0.2ml | GRM1： 促代謝型谷酸受體1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Cellulase 纖維素酶 規(guī)格 1ml | PCDH11Y： 原鈣粘附蛋白11Y抗體 0.2ml |
Anti-Phospho-Numb (Ser276)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化膜相關(guān)蛋白Numb抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GABAB1(GABAb Receptor 1) g-基B1受體(多肽) 0.5mg |
IgM/Gold 金標(biāo)記羊抗小鼠IgM(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | MRP2： 多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml |
OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | AZU1 Others Human 人 AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞RNAHLEC miRNA5 μg | 小鼠垂體細(xì)胞(MPC)(5×105) |
GFRA3 Others Human 人 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人食道上皮細(xì)胞(HEEC)(5×105 ) |
HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | LoVo細(xì)胞,，人結(jié)腸癌細(xì)胞 HEK293,人胚腎上皮細(xì)胞,293A細(xì)胞 腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19 | 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞PCDH11Y： 原鈣粘附蛋白11Y抗體 0.2ml |
HuH-7人肝癌細(xì)胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS | 人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓裂解物HMSC-bm L |
人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 | DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人肝細(xì)胞 (HH) (1×106 ) CHO, 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系 其它 | Anti-IL-10R/CD210/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞介素-10受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) 0酸化S6核糖體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 大鼠癌細(xì)胞;MADB106 胃腺癌細(xì)胞，AGS細(xì)胞 SDBMSC細(xì)胞,，SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 |
Rhesus antibody Rh phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513) 0酸化上皮酪激酶抗體(癌激酶10) 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLF9/BTEB1 轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體 規(guī)格 0.1ml |
RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細(xì)胞抗體 96T | OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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