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詳細介紹
人腎小管上皮原代細胞?細胞
人腎小管上皮細胞分離自腎組織,；腎臟是機體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖,、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等，以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素,、促紅細胞生成素,、活性D3、前列腺素,、激肽等,，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用,。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管,、髓袢和遠端小管三部分,；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管,，位于皮質(zhì)迷路內(nèi),，于腎小體附近高度蟠曲；遠端小管曲部也稱為遠曲小管,，位于皮質(zhì)迷路內(nèi),。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞，腎小管上皮細胞的分離,、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項重要技術(shù),，目前該細胞分離方法有酶分離法、化學分離法篩網(wǎng)分離法,、顯微解剖分離法,、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能：①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸,；②排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進入終尿,；③細胞能分泌炎癥介質(zhì)如細胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應(yīng),；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,，這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發(fā)生,。隨著對腎間質(zhì)纖維化機制研究的日漸加深，腎小管上皮細胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視,。因此,，提供良好的腎小管上皮細胞模型，在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的,。
英文名稱 | Human Renal Tubular Epithelial Cells | 組織來源 | 腎組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7580 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人腎小管上皮細胞
組織來源：腎組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腎小管上皮細胞 采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腎小管上皮細胞 經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
BB7.2細胞， 分泌A2抗體B淋巴細胞 大鼠肉瘤細胞,WK256細胞 人臍動脈平滑肌細胞裂解物HUASMCL | AARSD1： 含丙酰tRNA合成酶結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml |
Anti-HMGB4 高遷移率族蛋白B4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABCD1/CCL22 嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗體 規(guī)格 0.1ml |
anti-cath-B/CB/FITC 熒光素標記組織蛋白酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IDH3A 草酰琥珀酸脫羧酶α抗體 規(guī)格 0.2ml |
Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3) 整合素-β3(抗原) 0.5mg | large S protein： 人Large S蛋白抗體 0.1ml |
IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的驢抗羊IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM134C FAM134C蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | MSTO-211H 人肺癌細胞株 |
NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽) |
小鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 (His 標簽) |
角膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | CTLL-2(小鼠T細胞) 5×106cells/瓶×2 |
F9小鼠畸胎瘤細胞 F9 mouse teratoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 人腎小管上皮原代細胞Rhesus antibody Rh IDH3A 草酰琥珀酸脫羧酶α抗體 規(guī)格 0.2ml |
BRL-3A(大鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2 | AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Vero非洲綠猴腎細胞 Vero the African green monkey kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 人星形膠質(zhì)細胞HA |
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 | Rhesus antibody Rh sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml |
SP-B(Human Pulmonary surfatcant-associated protein B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B 96T | MN-c, 小鼠皮質(zhì)元 |
MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | NA(Human Noradrenaline) ELISA Kit 人去甲Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MeCP2： 甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml | NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
人腎小管上皮原代細胞
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