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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人小膠質采用酶消化法結合差速貼壁法,，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數天后經搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人小膠質經CD11b免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產品名稱 | 人神經小膠質原代細胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Human Microglia Cells | 貨號 | YS-01X7393 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人小膠質細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球,，大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,，它是元胞體集中的地方。內部則是由纖維或髓鞘構成的白質,。每一個半球都有三個面,，即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積),；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側面重要的溝,、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質組分為額葉、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。小膠質細胞是膠質細胞的一種，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,，是中樞系統(tǒng)(CNS)中的第一道也是主要的一道免疫防線,。小膠質細胞大約占大腦中的膠質細胞的20%，小膠質細胞不停地清除著中樞系統(tǒng)中的損壞的,，斑塊及感染性物質,。無數臨床上和病理學研究表明激活的小膠質細胞在退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病,、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等,。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源,，如腫瘤壞死因子(TNF),，一氧化氮，白介素等有毒性的物質,。小膠質細胞的主要功能：①膠質出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉化的過程中,；②當程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中,，中樞系統(tǒng)受損或受到病理損壞時,，膠質可做為大腦的巨噬細胞；③膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 （12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產品：
CNE1細胞，人鼻咽癌細胞(高分化) 小鼠骨髓瘤細胞,P3-X63-Ag8.653細胞 草魚肝臟細胞;L8824 | CXCR3(Mouse CXC-chemokine receptor 3) ELISA KIT 小鼠CXC趨化因子受體3 96T |
RPLP2： 酸性核糖體0蛋白P2抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Rab27a RAM-11抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HCV-NS4a/FITC 熒光素標記丙型肝炎病毒-NS4a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C6orf62： 6號染色體開放閱讀框62抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRMS1 癌轉移抑制基因1抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-CTSC/PALS/DPP-I/FITC 熒光素標記組織蛋白酶C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
原活化蛋白激酶3抗體 Anti-MAPK1/ERK3 0.1ml | phospho-Androgen Receptor (Ser515)： 0酸化雄激素受體抗體 0.1ml |
NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | U87MG 人惡性膠質母細胞瘤細胞 |
CL-0307SW1116(人結腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | RSC, 大鼠雪旺細胞 |
小鼠卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白 (His 標簽) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928 | CL-0072Daudi(人淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
F98大鼠腦膠質瘤細胞 F98 rat glioma cells DMEM+10%FBS | 人神經小膠質原代細胞C6orf62： 6號染色體開放閱讀框62抗體 0.2ml |
動物星形膠質細胞培養(yǎng)基AM-a | MN-c, 小鼠皮質元 |
CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人母細胞瘤細胞;SH-SY5Y |
人腎癌細胞;A498 | IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GSTA3 S轉移酶A3抗體 規(guī)格 0.1ml | 人前列腺平滑肌細胞HPSMC |
EB3： 微管相關蛋白EB家族3抗體 0.2ml | Anti-Lpin1 protein Lpin1 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TG(Mouse Thyroglobulin) ELISA Kit 小鼠甲狀腺球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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