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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
?方法簡介
公司實驗室分離的人乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人乳腺上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人乳腺上皮原代細胞 | 組織來源 | 乳腺組織 |
英文名稱 | Human Mammary Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7073 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人乳腺上皮細胞分離自乳腺組織,；乳腺是復管泡狀皮膚腺,，主要由腺上皮細胞組成,，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,，導管末梢發(fā)育成腺泡,；近年來的許多研究都表明乳腺癌,、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細胞（MEC）有密切聯系，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關鍵步驟,。乳腺是乳房的腺體組織,，乳腺由導管和腺泡組成,，腺泡是分泌乳汁的重要部分,。乳腺的正常發(fā)育是由體內激素和局部合成的生長因子共同調控，其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖,、分化,、凋亡產生極大的影響,。乳腺上皮細胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織,，為貼壁生長型細胞，呈多角形,、圓形以及短梭形,；乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
公司產品：
雪羊皮膚細胞;SSHS1 | EMA IgA ELISA Kit 大鼠抗肌內膜抗體IgAMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf135： 1號染色體開放閱讀框135抗體 0.2ml | Glu-Glu Tag： Glu-Glu tag抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CENPB 著絲粒蛋白B抗體 規(guī)格 0.2ml | PCDHA1： 原鈣粘附蛋白α1抗體 0.2ml |
Anti-NOS-2/iNOS/FITC 熒光素標記合成酶-2抗體(誘導型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化生長相關蛋白43抗原 0.5mg |
Goat Anti-human IgA/Gold 金標記羊抗人IgA(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | 5 MethylCytosine： 5甲基胞嘧啶抗體 0.1ml |
VCL Others Human 人 VCL / Vinculin 人細胞裂解液 (陽性對照) | NHEK-c adult 正常人表皮角質形成細胞(NHEK)成年單一捐獻者 500,000cells 原代骨細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml |
人脈絡叢內皮細胞cDNAHCPEC cDNA | CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human 人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人羊膜細胞;WISH SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 Human | CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺動脈內皮細胞(HPAEC) ( 5×105 ) rCSC, 大鼠心肌細胞 Rattus | HT-29細胞,，人結腸癌細胞 人胚腎細胞,293細胞 腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml) |
T-112乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | 人乳腺上皮原代細胞PCDHA1： 原鈣粘附蛋白α1抗體 0.2ml |
HNE2-LMP1細胞，人鼻咽癌細胞系 小鼠肝癌細胞,Hepa 1-6細胞 CM-H079人心臟微血管內皮細胞培養(yǎng)基100mL | 人間充質干細胞(脂肪)cDNAHMSC-ad cDNA |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1022 | TSPAN31 Others Human 人 TSPAN31 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml | Anti-Il-7R a/CD127 /FITC 熒光素標記白細胞介素-7受體a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-ROCK2 Rho相關蛋白激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CM-H123人小膠質細胞培養(yǎng)基100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-GRB10 (Tyr67) 0酸化生長因子受體結合蛋白10抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHDC8A KLHDC8A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit 大鼠CD3分子 96T | VCL Others Human 人 VCL / Vinculin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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