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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-01X7093 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
詳細(xì)介紹
人前列腺成纖維原代細(xì)胞
人前列腺成纖維細(xì)胞分離自前列腺組織,；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子，底朝上,，與膀胱相貼,，尖朝下,，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合,，后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò)，扼守著尿道上口,，所以,，前列腺有問(wèn)題時(shí)，排尿首先受影響,。前列腺是機(jī)體非常少有的,，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺,，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分,；作為內(nèi)分泌腺,，前列腺分泌的激素稱(chēng)為“前列腺素"。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的前列腺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng),，平坦、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱(chēng) | Human Prostate Smooth Muscle Cells | 組織來(lái)源 | 前列腺 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7093 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：人前列腺成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：前列腺
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | MDC1： DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MCSF/M-CSF 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TRF1/FITC 熒光素標(biāo)記端粒結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1) TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗原 0.5mg | anti-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-Gab2/FITC 熒光素標(biāo)記接頭蛋白Gab 2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC40A1 細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-pEGFR(pTyr1068)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
DAPK3 Others Human 人 DAPK3 / ZIPK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS 人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞總RNAHCPEpiC NA | 小鼠淋巴纖維細(xì)胞(MLF)(5×105) |
RLN1 Others Human 人 RLN1 / Relaxin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠腹脊髓元RN-vsc | PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));F9-CAG-tTA-1A3 | 人前列腺成纖維原代細(xì)胞anti-OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
APOA1 Others Mouse 小鼠 APOA1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 |
盤(pán)羊皮膚細(xì)胞;ASHS2 | 人小膠質(zhì)細(xì)胞(HM) ( 5×105 ) 人海馬元 Human |
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | GPR113： G蛋白偶聯(lián)受體GPR113蛋白抗體 0.2ml |
Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人Ⅷ相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體 Anti-ACTH 0.1ml | M-AChR(Human music acetylcholine receptor) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰受體 96T |
Axin 2： 軸抑制蛋白2抗體 0.2ml | DAPK3 Others Human 人 DAPK3 / ZIPK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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