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詳細介紹
人破骨原代細胞
人破骨細胞分離自骨組織和骨髓,；破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞,，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng),，其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞,。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化,。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結(jié)構(gòu),、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機制,。但破骨細胞是一種終末分化細胞,，屬于不增殖細胞群，不能增殖和傳代,，只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短,。
英文名稱 | Human Osteoclast Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7352 |
細胞形態(tài) | 多核巨細胞 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人破骨細胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 多核巨細胞
傳代特性 屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人破骨采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導(dǎo)法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人破骨經(jīng)TRAP染色檢測,，純度可達30%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
胰腺星狀細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Anti-TSARG4 生精細胞凋亡相關(guān)基因4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人堿性0酸酶 96T | Anti-MLCK/FITC 熒光素標記肌球蛋白輕鏈激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIP47/M6PRBP1 脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體 規(guī)格 0.2ml | NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HEPACAM： 肝細胞粘附分子抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh CCDC106 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體 規(guī)格 0.2ml |
FAM3B/PANDER： 胰腺衍生因子抗體 0.2ml | ALCAM ELISA Kit 大鼠白細胞活化黏附因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
IRAK4 Others Human 人 IRAK4 / IRAK-4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人臍帶靜脈平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細胞株 Human |
人男性正常細胞;Hs68 | CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CPA1 Others Mouse 小鼠 CPA1 / CPA / Carboxypeptidase A1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細胞裂解液 (陽性對照) | SFRP2 Others Mouse 小鼠 sFRP2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 | 人破骨原代細胞NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞) 5×106cells/瓶×2 溶組織梭菌Closidium histolyticum | 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) |
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標簽) | DMF7細胞,，雙位點HC-KIT受體細胞株 人癌高轉(zhuǎn)移細胞,MDA-MB-435細胞 間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基MSCM-sf |
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PSAP/PAP/FITC 熒光素標記前列腺酸性0酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
OPCML： 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體 0.1ml | 人臍靜脈內(nèi)皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304] 人腸靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
SPHK2： 鞘醇激酶2抗體 0.2ml | Centaurin gamma 1： 中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/FITC FITC標記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.3ml | IRAK4 Others Human 人 IRAK4 / IRAK-4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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