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詳細介紹
人胚肺成纖維原代細胞
人胚肺成纖維細胞分離自胚肺組織,；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔,，左右各一,，覆蓋于心之上。肺有分葉,，左二右三,，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管,、支氣管等）與喉,、鼻相連，故稱喉為肺之門戶,，鼻為肺之外竅,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的胚肺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞在合成和分泌細胞因子,、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用,。
英文名稱 | Human Embryonic Lung Fibroblast Cells | 組織來源 | 胚胎；肺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7490 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人胚肺成纖維細胞
組織來源：胚胎,；肺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人胚肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人胚肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
幼蚊細胞;C6/36 | NE ELISA Kit 大鼠粒細胞彈Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-alpha B Crystallin (Ser19)： 0酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 0.1ml | GRB2： 生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CENPT 著絲粒蛋白T抗體 規(guī)格 0.2ml | PCDHA7： 原鈣粘附蛋白α7抗體 0.2ml |
Anti-Nogo-B/A /FITC 熒光素標記軸索過度生長抑制因子-B/A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Gax(growth arrest-specific homeobox) 生長終止特異性同源盒基因抗原 0.5mg |
Goat Anti-bovine IgG/Gold 金標記羊抗IgG(10/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | Angiotensin II Type 2 Receptor： 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 0.1ml |
SLC3A2 Others Rat 大鼠 SLC3A2 / CD98 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人上皮細胞;MCF-10A 人前列腺平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
人腦干星形膠質(zhì)細胞HA-bs | STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CEACAM1 Others Human 人 CEACAM1 / CD66a 人細胞裂解液 (陽性對照) | ERBB2 Others Mouse 小鼠 ErbB2 / HER2 / CD340 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人細胞裂解液 (陽性對照) | EC9706人食管癌細胞 Human esophageal cancer cell line EC9706. DMEM+10%FBS |
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 | 人胚肺成纖維原代細胞PCDHA7： 原鈣粘附蛋白α7抗體 0.2ml |
豚鼠皮膚細胞;GP-S3 非洲綠猴腎細胞，CV-1細胞 SMC細胞,，兔主動脈平滑肌細胞 | 人脊髓星形膠質(zhì)細胞cDNAHA-sp cDNA |
CL-0173NRK(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2 | HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
hMNC-PB-c single donorula-pure 外周血來源的人類單核細胞 人髓核細胞HNPC | Anti-IL-6/FITC (mouse,、rat) 熒光素標記白介素6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-RICTOR 雷帕靶蛋白復(fù)合體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | NCI-H596細胞，人肺腺鱗癌細胞 小鼠Mo-MuLv感染的3T3細胞,Mo-MuLV/3T3細胞 CM-R079大鼠冠狀動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser212) 0酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch樣蛋白14抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBeAb 乙型肝炎e抗體 96T | SLC3A2 Others Rat 大鼠 SLC3A2 / CD98 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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