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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人膀胱移行上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人膀胱移行上皮經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 人膀胱移行上皮原代細胞 | 組織來源 | 膀胱組織 |
英文名稱 | Human Bladder Transitional Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7255 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人膀胱上皮細胞分離自膀胱組織；膀胱是一個儲尿器官,，在哺乳類動物,，它是由平滑肌組成的一個囊形結(jié)構(gòu)，位于骨盆內(nèi),，其后端開口與尿道相通,。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成,，由內(nèi)向外為黏膜層,、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,，稱為逼尿肌,，逼尿肌收縮，可使膀胱內(nèi)壓升高,，壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌，形成尿道內(nèi)括約肌,。在括約肌收縮能關閉尿道內(nèi)口,，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）,、肌肉層（逼尿肌,、膀胱三角區(qū)肌）和黏膜層（極薄的一層移行上皮組織）,。其主要作用有：①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分,；②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細胞和上皮細胞,，進而影響腎臟病變,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
BA/F3細胞，小鼠原B細胞 人浸潤性導管癌旁皮膚細胞,CCD-1095Sk細胞 NeuroFectagen? 細胞轉(zhuǎn)染試劑盒 | AGXT2L2： AGXT2L2蛋白抗體 0.2ml |
Anti-HIV-1 ENV (gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABCG5 三0酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標記兔抗人,、大,、小鼠0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFI44 干擾素誘導蛋白44抗體 規(guī)格 0.2ml |
M2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原) 0.5mg | H5N1 Matrix Protein 2： A型病毒H5N1-M2蛋白抗體 1ml |
IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM154A FAM154A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞;Vero E6 | MPC-83 胰腺腺泡細胞癌 |
IMR-32人母細胞瘤細胞 IMR-32 human neuroblastoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽) |
CM-M115小鼠小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基100mL | C6(大鼠膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | IL6 Protein Human 重組人 IL6 / Ierleukin-6 蛋白 |
M2e細胞，人喉癌細胞 人腸系膜下腔動脈血管內(nèi)皮細胞,Ealy926細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1 | 人膀胱移行上皮原代細胞Rhesus antibody Rh IFI44 干擾素誘導蛋白44抗體 規(guī)格 0.2ml |
人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk | SCGB1A1 Others Human 人 SCGB1A1 / Uteroglobin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HepG2細胞,，肝細胞癌 人T淋巴瘤細胞系,Hut-102細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3 | 小鼠肝外膽管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
HT-29, 人結(jié)腸癌細胞 | Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
IFI16/p16(Mouse interferon-inducible protein 16) ELISA Kit 小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16 96T | RH-35(大鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3) 葡萄糖合成激酶-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | TXB2(Human Thromboxane B2) ELISA Kit 人血栓素B2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
p95 NBS1： 細胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體 0.2ml | 非洲綠猴腎細胞;Vero E6 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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