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本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人尿道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人尿道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人尿道上皮原代細胞 | 組織來源 | 尿道組織 |
英文名稱 | Human Urethral Epithelial cells | 貨號 | YS-01X7269 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人尿道上皮細胞分離自尿道管組織,；尿道是從膀胱通向體外的管道,。尿道上皮細胞主要功能：①尿道上皮細胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細胞組成,；②上皮細胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸,，它們具有多種防御機制來阻止病原體粘著，保持泌尿器溶解物的不滲透性,；③膀胱上皮細胞表達雌激素α,、β受體，上皮生長因子受體和纖維母細胞生長因子受體,，在損傷和感染時,，這些受體對膀胱上皮細胞起著重要作用；④能釋放許多細胞因子,、免疫系統(tǒng)介質(zhì),。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦膠質(zhì)瘤細胞 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS | Rhesus antibody Rh Ghrelin 28 腦腸肽抗體 規(guī)格 0.1ml |
P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人P53Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGF1R： 胰島素樣生長因子1受體抗體 0.1ml | GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶MM 96T |
Rhesus antibody Rh Ribonuclease Inhibitor 核糖核酸酶抑制因子1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC 熒光素標記0酸化核纖層蛋白A/C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr181) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | IL-27(human Interleukin 27) ELISA Kit 人白介素27 96T |
IL2 Protein Mouse 重組小鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 | CM-R008大鼠支氣管成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
小鼠腎足細胞;Mouse podocyte 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse |
BT474 人導管癌細胞 | MSTN Protein Mouse 重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標簽) |
II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL | 硝基苯酸(p)酸酶檢測試劑盒p |
WI-38人胚肺細胞 WI-38 in human embryo lung cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 人尿道上皮原代細胞GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶MM 96T |
人主動脈內(nèi)皮細胞RNAHAEC miRNA5 μg | Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293sars181A 人膀胱上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H033人腸微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL |
人胚胎,，皮膚，肌肉;M-7 | Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-B-Raf (Ser444)： 0酸化B-Raf抗體 0.1ml | 人海馬元 |
Anti-Smad4/FITC 熒光素標記Smad4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PEBP2B： 多瘤病毒增強了結(jié)合蛋白2β抗體 0.1ml |
Anti-CD155/PVR/FITC 熒光素標記CD155抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | IL2 Protein Mouse 重組小鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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