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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人腦靜脈血管內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法,、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人腦靜脈血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
產品名稱 | 人腦靜脈血管內皮原代細胞 | 組織來源 | 腦靜脈組織 |
英文名稱 | Human Brain Venous Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7376 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人腦靜脈血管內皮細胞分離自腦靜脈組織；與腦動脈相比,，腦靜脈管壁較薄,。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣,，靜脈血的回流依賴高位的勢能,。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經腦深部靜脈和腦血竇流入頸內靜脈醫(yī)|學教育網搜集整理；小部腦靜脈血經眼部翼狀靜脈叢,，進入靜脈導血管再到頭皮,，后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢,，即使兩側頸內靜脈都被阻塞,，大腦靜脈血仍可經椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈血管內皮細胞的主要功能是維持血管內外的動態(tài)平衡,，合成和分泌細胞因子和介質參與免疫反應,，維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產品：
獼猴肺細胞;MML2 | ADAM8 ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8 96T |
RNF169： 環(huán)指蛋白169抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh RAB40B RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒UL23抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CMTM2： 趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRP44L 腦蛋白44樣蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-CT-R/FITC 熒光素標記降鈣素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗體 Anti-EpCAM 0.2ml | Annexin A13： 膜粘連蛋白13抗體 0.2ml |
WM451, 人黑色素瘤細胞 | CL-0455TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
人細胞;C-33A 大鼠主動脈內皮細胞培養(yǎng)基 100mL | b16 小鼠黑色素瘤細胞 |
腸動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 羅猴胎腎細胞;MA104 |
MouseS 小鼠皮膚成纖維樣細胞 | CL-0058CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞)5×106cells/瓶×2 |
Hep G2細胞，肝癌細胞 人細胞(HPV-18永生化細胞),HeLa229細胞 人臍帶間充質干細胞cDNAHUMSC cDNA | 人腦靜脈血管內皮原代細胞CMTM2： 趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml |
大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J | 細胞名稱 M-37細胞 G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細胞) |
Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 SARS Spike S1 Subunit 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記)) 5×106cells/瓶×2 |
人羊膜細胞;HA | Rabbit Anti-IgG/APC APC標記的兔抗豬IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 三0酸鳥苷環(huán)水解酶抗體 規(guī)格 0.2ml | 人前列腺癌細胞;LNCaP |
FAK： 粘著斑激酶抗體 0.1ml | Anti-Lamin B 核纖層蛋白B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TFPI(Mouse Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit 小鼠組織因子途徑抑制物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | WM451, 人黑色素瘤細胞 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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