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詳細介紹
人腦動脈血管內(nèi)皮原代細胞
人腦動脈血管內(nèi)皮細胞分離自腦動脈組織,；腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動脈拌行，所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級靜脈都沒有瓣膜,，它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈血管內(nèi)皮細胞主要功能：①維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡,；②合成和分泌細胞因子和介質(zhì),；③維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
英文名稱 | Human Brain Artery Vascular Endothelial Cells | 組織來源 | 腦動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7370 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人腦動脈血管內(nèi)皮細胞
組織來源：腦動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腦動脈血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腦動脈血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1 張氏肝細胞，HeLa[Chang Liver]細胞 LLC-PK1細胞,，豬腎細胞 | Rhesus antibody Rh Ghrelin/Obestatin 腦腸肽抗體 規(guī)格 0.1ml |
TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGFBP2： 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml | Col III ELISA Kit 大鼠Ⅲ型膠原 96T |
Rhesus antibody Rh RICTOR 雷帕靶蛋白復(fù)合體2抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-lamin C/FITC 熒光素標(biāo)記核纖層蛋白C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr205) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | TPO-Ab ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 96T |
人肺成纖維細胞;HFL1 | 人細胞;Hela S3 [HeLaS3] |
A-431細胞,，表皮癌細胞 人耐VCR胃腺癌細胞,SGC-7901/VCR細胞 豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02 | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 |
人支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B | C918(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9801 | TUNEL色標(biāo)法細胞凋亡檢測試劑盒TUNEL |
HKC細胞，人胚腎上皮細胞 大鼠肺泡巨噬細胞,NR8383細胞 CL-0381MDA-MB-175VII(人導(dǎo)管癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人腦動脈血管內(nèi)皮原代細胞Col III ELISA Kit 大鼠Ⅲ型膠原 96T |
人上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | DLL4 Others Human 人 DLL4 / Delta4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
LILRB2 Others Human 人 LILRB2 / ILT4 / LIR-2 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H031人食管上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-B-Raf (Ser602)： 0酸化B-Raf抗體 0.1ml | CM-H114人前脂肪細胞培養(yǎng)基100mL |
Anti-SATB1/FITC 熒光素標(biāo)記核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PDE4D： 0酸二酯酶4D抗體 0.1ml |
Anti-CD151/MER2/PETA-3/FITC 熒光素標(biāo)記CD151抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人肺成纖維細胞;HFL1 |
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