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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人毛囊干采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人毛囊干經(jīng)CK19、CD200免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 人毛囊干原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 毛囊組織 |
英文名稱 | Human Hair Follicle Stem Cells | 貨號(hào) | YS-01X7686 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人毛囊干細(xì)胞分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮,。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,，附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,，毛囊在皮膚表面的開(kāi)口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織,。毛囊干細(xì)胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一種細(xì)胞,。毛囊干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,，在體內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài)，在體外培養(yǎng)作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力,。研究發(fā)現(xiàn),，毛囊干細(xì)胞具有多向分化潛能，它可以分化成表皮,、毛囊,、皮脂腺，參與皮膚創(chuàng)傷愈合的過(guò)程,。毛囊干細(xì)胞和其它成體干細(xì)胞一樣,，具有慢周期性、未分化性,、自我更新和體外增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),。毛囊干細(xì)胞分化經(jīng)毛囊干細(xì)胞（hair follicle stem cells，FSC）,、短暫增殖細(xì)胞（transit amplifying cells,，TAC）有絲分裂后分化細(xì)胞（postmitotic differentiating cells，PDC）三個(gè)階段,。毛囊干細(xì)胞在光鏡下呈立方形,，細(xì)胞體積小，核漿比率大,，表面光滑,，皺褶少，又被稱為非鋸齒形細(xì)胞,，細(xì)胞體積的增大與增殖能力呈負(fù)相關(guān),。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞表面有少許微絨毛，細(xì)胞核存在許多卷曲,，染色質(zhì)彌散分布,，這些形態(tài)特征均表現(xiàn)出原始細(xì)胞的特性。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次,；
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右；
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
HFL-I細(xì)胞,，人胚肺成纖維細(xì)胞 鼠肌原細(xì)胞,C2C12細(xì)胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | ANKS6： 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml |
Anti-HIV gp41 艾滋病病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ABH8/ALKBH8 AlkB同源蛋白8抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti- Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC 熒光素標(biāo)記α-連環(huán)蛋白抗體(α-α鏈接素)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFITM1/CD225 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml |
p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810) 0酸化Rho鳥(niǎo)苷酸交換因子2抗原 0.5mg | HAI-1： 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體 0.1ml |
IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM156A/TMEM2 跨膜蛋白29抗體 規(guī)格 0.2ml |
SK-N-SH(人母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E |
SFPAC-1細(xì)胞,，人胰腺癌細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P60細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2 | J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1 | 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA |
人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10 | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(拉祜族);KM9406 |
RKO細(xì)胞,，結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞系,SUME-a細(xì)胞 CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 人毛囊干原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh IFITM1/CD225 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml |
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) | SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Kasumi-1細(xì)胞，人急性成髓細(xì)胞白血病 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株,L7912細(xì)胞 超氧化物歧化酶分析試劑盒SOD | 子宮平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系 | Rhesus antibody Rh IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
Cpn-Ab(Human Chlamydia pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎衣原體抗體 96T | EAC(小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 100ug | MT(Human Melatonin) ELISA Kit 人褪黑素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MPP9： 有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體 0.2ml | SK-N-SH(人母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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