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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 人卵巢微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞 | 組織來源 | 卵巢組織 |
英文名稱 | Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7660 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自卵巢組織,；卵巢是雌性動物的生殖器官,，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化）,，呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),。大多數(shù)脊椎動物有兩個(gè)卵巢，但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能,。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織,，其下方有薄層的結(jié)締組織,。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成,；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,，其中有許多血管,、淋巴管和。微血管又稱毛細(xì)血管,。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管,。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7～9微米,，數(shù)量極多,，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,，厚約0.5微米,。基膜外面有薄層結(jié)締組織,，其中有纖維細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。細(xì)的微血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,，較粗的微血管由2～3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成,。分布于肌肉組織、組織和結(jié)締組織中的微血管,，內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃）,，稱連續(xù)微血管,。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān),。近年來血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥,、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn),，不同來源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征,、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞,，它們又存在器官和組織的特異性,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
A549[A-549]細(xì)胞,，肺癌細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,SMMC-7721細(xì)胞 T-104BII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | Rhesus antibody Rh GHRF/GHRH 生長激素釋放激素抗體 規(guī)格 0.1ml |
MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGFBP5： 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5抗體 0.1ml | AHA(Human anti-Histone antibody) ELISA Kit 人抗組蛋白抗體 96T |
Rhesus antibody Rh RIL 抑癌基因PDLIM4抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-lamin B/FITC 熒光素標(biāo)記核纖層蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr212) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | IL-28(human Interleukin 28) ELISA Kit 人白介素28 96T |
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] | B95-8 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞 |
CL-0190RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 |
人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2 | 人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1 | β-半乳糖苷酶比色檢測試劑盒GalC |
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5 大鼠肝細(xì)胞,，BRL 3A細(xì)胞 NBLE細(xì)胞，新生牛眼晶體上皮細(xì)胞 | 人卵巢微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞AHA(Human anti-Histone antibody) ELISA Kit 人抗組蛋白抗體 96T |
肝動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 Human |
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-H030人外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
人胚胎,，皮膚,，肌肉;M-22 | Rhesus antibody Rh APOE3 載脂蛋白E3抗體 規(guī)格 0.2ml |
PNK1： 多聚合苷酸激酶30酸化酶抗體 0.2ml | 人子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Anti-Selenoprotein W/FITC 熒光素標(biāo)記硒蛋白W抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Profilin 2： 前纖維蛋白2抗體 0.1ml |
Anti-CD147/EMMPRIN/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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